人子宫颈上皮细胞

人子宫颈上皮细胞

基于组织块贴壁法从健康供体的子宫颈上皮细胞来源组织中获取初始细胞，经 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 传代后，采用特异性上皮细胞培养体系（K-SFM 基础培养基 supplemented with bovine pituitary extract）维持培养；通过免疫荧光双标技术检测 E-cadherin/CK5 共表达，Western blot 分析上皮标志蛋白表达谱，并结合Transwell模型评估细胞极化和紧密连接蛋白（ZO-1、Claudin）的定位表达。

产品名称：人子宫颈上皮细胞

英文名称： Human Cervical Epithelial Cells

组织来源： 子宫组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人子宫颈上皮细胞采用胶原酶消化法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的人子宫颈上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培养基： 人子宫颈上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 上皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人子宫颈上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

显微镜确认细胞汇合 75‑80%，吸出旧培养基，上皮细胞避免过度长满。

无菌 PBS 缓慢冲洗细胞层 2 次，去除代谢废物，移除 PBS。

加入上皮细胞专用消化液，37℃消化 4‑6min，镜下见细胞离散收缩。

加入上皮细胞完全培养基终止消化，轻柔吹打，不可暴力吹打损伤上皮。

细胞悬液转入离心管，900r/min 离心 5min，弃上清。

子宫颈上皮细胞完全培养基重悬沉淀，按合适密度接种新培养器皿。

37℃、5% CO₂培养箱培养，48h 观察贴壁，严格使用上皮专用培养基，2‑3 天换液。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.培养器皿需提前用0.1mg/ml多聚赖氨酸包被过夜，未包被的培养板细胞贴壁效率极低。

3.该细胞类型体外培养寿命有限，原代细胞通常在5-10代内出现衰老现象。

4.补充10ng/ml表皮生长因子(EGF)和20ng/ml胰岛素样生长因子(IGF-1)。

5.使用人源组织标本需获得伦理委员会批准及患者知情同意，操作需符合生物安全规范。 传代时用PBS轻柔洗涤2次后加入0.25%胰蛋白酶，室温作用2-3分钟收集细胞。