人支气管成纤维细胞

人支气管成纤维细胞

运用胶原酶 I 消化法从健康供体支气管成纤维细胞组织中提取间充质成分，经密度梯度离心去除血液细胞后，接种于胶原 IV 包被的培养表面，使用含 10% FBS 的 DMEM/F12 培养基培养；通过流式细胞术分析 CD90+、CD44+、CD105+ 阳性率及 CD34-、CD45- 阴性率，免疫荧光染色显示 vimentin 强阳性、角蛋白阴性，并经成纤维细胞集落形成实验验证增殖能力。

产品名称：人支气管成纤维细胞

英文名称： Human Bronchial Fibroblasts

组织来源： 支气管组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人支气管成纤维细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人支气管成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人支气管成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人支气管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管 37℃水浴快速解冻，微量冰晶残余取出。

酒精消毒管壁，超净台转移细胞悬液入离心管。

1000rpm 离心 5min，弃上清废液。

支气管成纤维细胞完全培养基吹打重悬细胞沉淀。

细胞计数，接种培养瓶，十字摇匀。

37℃、5% CO₂培养箱静置，24h 观察贴壁。

汇合 80% 弃旧培养基，更换新鲜培养基，开展传代。

1.全程操作需在超净工作台内无菌条件下进行，任何污染风险均可能导致实验失败。

2.培养表面需用纤维连接蛋白(10ug/ml)或层粘连蛋白包被，室温孵育2小时。

3.该细胞对培养条件较为敏感，建议初次培养时设置多个平行实验以提高成功率。

4.培养基中需添加20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持细胞增殖活性。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。