人胰岛β细胞

人胰岛β细胞

运用胶原酶消化-密度梯度离心联合法从健康供体胰腺组织中分离胰岛细胞群，经手工挑选纯化胰岛后接种于纤连蛋白包被的培养表面，使用 RPMI-1640 高糖培养基（含 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺及 50 μM 2-巯基乙醇）培养；通过免疫荧光双标检测 Insulin/CK19（导管标志）共阴性排除污染，免疫组化显示 PDX-1、Ngn3 等胰岛发育转录因子表达，并检测低高糖条件下胰岛素分泌比值评估β细胞功能完整性。

产品名称：人胰岛β细胞

英文名称： Human Pancreatic Islet β Cells

组织来源： 胰腺组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人胰岛β细胞采用先用胶原酶消化分离得到胰岛、再用胰酶逐级消化胰岛制备而来。

质量检测  实验室分离的人胰岛β细胞经Insulin含量检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）

培养基： 人胰岛β细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 不传代

传代特性： 不建议传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人胰岛β细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管 37℃水浴快速融化，剩余少量冰晶马上取出。

酒精擦拭外壁，超净台小心转移细胞悬液至离心管。

800rpm 离心 6min，缓慢吸除上清，减少细胞损伤。

胰岛 β 细胞专用完全培养基轻柔重悬细胞团，禁止剧烈吹打。

细胞计数，接种经包被处理的培养板。

37℃、5% CO₂培养箱静置，48h 观察细胞存活与贴壁。

半量换液，吸出一半旧培养基，补同等体积预热新培养基，严禁全弃培养基。

1.实验全程需在生物安全柜中操作，避免空气中的微生物污染培养体系。

2.培养板需预先用胶原I型(50ug/ml)包被过夜，以增强细胞贴壁能力。

3.细胞冻存后复苏需快速 thawing，37度水浴快速解冻后迅速加入预温培养基稀释DMSO。

4.培养基中需添加20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持细胞增殖活性。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。