人心脏纤维原细胞

人心脏纤维原细胞

运用胶原酶 I 消化法从健康供体心脏纤维原细胞组织中提取间充质成分，经密度梯度离心去除血液细胞后，接种于胶原 IV 包被的培养表面，使用含 10% FBS 的 DMEM/F12 培养基培养；通过流式细胞术分析 CD90+、CD44+、CD105+ 阳性率及 CD34-、CD45- 阴性率，免疫荧光染色显示 vimentin 强阳性、角蛋白阴性，并经成纤维细胞集落形成实验验证增殖能力。

产品名称：人心脏纤维原细胞

英文名称： Human Cardiac Fibroblast Cells

组织来源： 心脏组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人心脏纤维原细胞采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人心脏纤维原细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人心脏纤维原细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人心脏纤维原细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管 37℃水浴快速解冻，仅剩微量冰晶取出。

酒精消毒管壁，超净台转移细胞悬液至离心管。

1000rpm 离心 5min，弃上清废液。

加入心脏纤维原细胞完全培养基，轻柔吹打重悬。

细胞计数，按标准密度接种，十字摇晃混匀。

37℃、5% CO₂培养箱静置培养，24h 观察贴壁情况。

细胞汇合 80%，去除旧培养基，更换新鲜培养基，准备传代。

1.操作过程中需严格无菌操作，任何微生物污染都会导致细胞死亡或实验结果偏差。

2.使用未包被的常规培养瓶即可，成纤维细胞贴壁能力强，一般在24小时内即可见细胞从组织块边缘迁出。

3.长期培养中需定期检测细胞标志物表达，确保细胞身份和纯度不受影响。

4.培养基中需加入1%胰岛素转铁蛋白硒(ITS)补充剂和10nM地塞米松。

5.换液时每2-3天更换一次新鲜培养基，成纤维细胞代谢旺盛需及时补充营养和清除代谢产物。