人胃黏膜上皮细胞

人胃黏膜上皮细胞

基于组织块贴壁法从健康供体的胃黏膜上皮细胞来源组织中获取初始细胞，经 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 传代后，采用特异性上皮细胞培养体系（K-SFM 基础培养基 supplemented with bovine pituitary extract）维持培养；通过免疫荧光双标技术检测 E-cadherin/CK5 共表达，Western blot 分析上皮标志蛋白表达谱，并结合Transwell模型评估细胞极化和紧密连接蛋白（ZO-1、Claudin）的定位表达。

产品名称：人胃黏膜上皮细胞

英文名称： Human Gastric Mucosal Epithelial Cells

组织来源： 胃组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人胃黏膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的人胃黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培养基： 人胃黏膜上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 上皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人胃黏膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管取出，37℃水浴快速复融，酒精消毒管壁，移入超净工作台。

细胞悬液转移离心管，胃黏膜上皮完全培养基稀释冻存液。

1200rpm 离心 5min，弃上清冻存液，保留细胞沉淀。

加入上皮完全培养基，轻柔吹打重悬细胞。

细胞计数，调整接种密度，接种包被的培养瓶。

37℃，5% CO₂培养箱静置孵育。

24h 镜检贴壁，更换培养基，汇合 70‑80% 开展传代。

1.所有试剂需提前预热至37度，冷试剂直接加入会显著降低细胞存活率。

2.培养器皿无需特殊包被，普通培养板即可支持平滑肌细胞贴壁，但用纤连蛋白包被可增强细胞贴附。

3.平滑肌细胞体外可增殖，传代比例1:3至1:4，细胞长至80-90%融合时进行胰酶消化传代。

4.补充10ng/ml表皮生长因子(EGF)和20ng/ml胰岛素样生长因子(IGF-1)。

5.培养期间每48小时换液，若发现细胞由梭形变为多角形可能提示表型转换，需调整实验时间窗。