人髓母细胞瘤组织源细胞

人髓母细胞瘤组织源细胞

基于酶消化-差速贴壁联合策略从健康供体髓母细胞瘤组织源细胞组织获取目标细胞，经密度梯度离心和预培养纯化后接种于特异性基质包被培养皿中，采用优化培养基体系（含 10% FBS 及针对性添加剂）维持培养；通过免疫细胞化学、流式细胞术及分子生物学方法综合鉴定细胞类型，并评估其体外增殖与功能特性。

产品名称：人髓母细胞瘤组织源细胞

英文名称： Human Medulloblastoma Tissue-Derived Cells

组织来源： 癌组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来。

质量检测  实验室分离的人髓母细胞瘤组织源细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人髓母细胞瘤组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人髓母细胞瘤组织源细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管取出，37℃水浴快速解冻，酒精擦拭管壁，送入超净台。

细胞悬液转移离心管，肿瘤组织源完全培养基稀释冻存保护剂。

1200rpm 离心 5min，弃上清，保留细胞沉淀。

加入肿瘤完全培养基，轻柔吹打重悬，打散组织细胞团块。

细胞计数，调整接种密度，接种培养瓶。

37℃、5% CO₂培养箱静置孵育。

24‑48h 镜检贴壁，换液去除细胞碎片死细胞，观察肿瘤细胞增殖，适时传代。

1.所有试剂需提前预热至37度，冷试剂直接加入会显著降低细胞存活率。

2.培养板需预先用胶原I型(50ug/ml)包被过夜，以增强细胞贴壁能力。

3.该细胞对培养条件较为敏感，建议初次培养时设置多个平行实验以提高成功率。

4.培养基中需添加20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持细胞增殖活性。

5.传代时用PBS轻柔洗涤2次后加入0.25%胰蛋白酶，室温作用2-3分钟收集细胞。