人输尿管上皮细胞

人输尿管上皮细胞

利用胶原酶 IV 和透明质酸酶联合消化法从健康供体靶组织中分离输尿管上皮细胞，经 Percoll 梯度离心去除杂细胞后，接种于纤连蛋白包被的培养表面，采用 DMEM/F12 完全培养基（含 10% FBS、EGF 5 ng/mL 及胰岛素）进行体外扩增；通过流式细胞术检测上皮特异性抗原（ESA）、CD326 表达率，免疫细胞化学染色显示细胞骨架波形蛋白（Vimentin）阴性、细胞角蛋白阳性，并经功能实验验证其屏障功能完整性。

产品名称：人输尿管上皮细胞

英文名称： Human Ureteral Epithelial Cells

组织来源： 尿道组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人输尿管上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、然后机械分离法使输尿管分层、最后胶原酶消化，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的人输尿管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培养基： 人输尿管上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 上皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人输尿管上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管取出，37℃水浴快速复融，酒精消毒管壁，移入超净工作台。

细胞悬液转移离心管，输尿管上皮细胞完全培养基稀释冻存液。

1200rpm 离心 5min，弃上清冻存液，保留细胞沉淀。

加入上皮完全培养基，轻柔吹打重悬细胞。

细胞计数，调整接种密度，接种包被培养瓶。

37℃，5% CO₂培养箱静置孵育。

24h 镜检贴壁，更换培养基，汇合 70‑80% 传代。

1.所有试剂需提前预热至37度，冷试剂直接加入会显著降低细胞存活率。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.该细胞对培养条件较为敏感，建议初次培养时设置多个平行实验以提高成功率。

4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。

5.细胞融合度达到70-80%时传代，胰酶消化时间控制在1-2分钟避免过度消化。