人食管癌组织源细胞

人食管癌组织源细胞

基于原代肿瘤组织酶消化法从健康供体癌组织标本获取单细胞悬液，经红细胞裂解和密度梯度离心纯化肿瘤细胞后，接种于含 10% FBS 和多种生长因子（EGF、IGF-1、NGF）的 Advanced DMEM/F12 培养基中培养；通过免疫组化检测肿瘤特异性抗原（如 AFP 肝癌、CA125 卵巢癌、PSA 前列腺癌等组织源特异性标志物），Ki-67 免疫荧光增殖指数>30%，并采用 xenograft 模型验证体内成瘤能力，RT-qPCR 分析肿瘤相关基因（如 p53、KRAS、MYC）突变表达谱。

产品名称：人食管癌组织源细胞

英文名称： Human Esophageal Cancer Tissue-Derived Cells

组织来源： 食管癌组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来。

质量检测  实验室分离的人食管癌组织源细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人食管癌组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人食管癌组织源细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管从液氮取出，37℃水浴快速复融，酒精消毒管壁，移入超净工作台。

细胞悬液转移离心管，加入肿瘤组织源细胞完全培养基稀释冻存液。

1200rpm 离心 5min，弃上清冻存液，保留细胞沉淀。

加入肿瘤专用完全培养基，轻柔吹打重悬细胞，组织源细胞易成团，适度吹打。

细胞计数，调整接种密度，接种培养瓶。

37℃、5% CO₂培养箱静置孵育。

24‑48h 镜检贴壁，更换培养基去除悬浮碎片与死细胞，观察肿瘤细胞克隆生长，适时传代。

1.操作过程中需严格无菌操作，任何微生物污染都会导致细胞死亡或实验结果偏差。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.细胞冻存后复苏需快速 thawing，37度水浴快速解冻后迅速加入预温培养基稀释DMSO。

4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。

5.传代时用PBS轻柔洗涤2次后加入0.25%胰蛋白酶，室温作用2-3分钟收集细胞。