产品名称 | 人肾足突细胞 | 组织来源 | 肾组织 |
英文名称 | Human Renal Podocytes | 种属 | 人 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X2952 |
方法简介 实验室分离的人肾足突细胞采用机械研磨过不同孔径不锈钢网筛结合胶原酶消化法制备而来。
质量检测 实验室分离的人肾足突细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 人肾足突细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人肾足突细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：健康成人供体，取肝脏组织约2-3g
试剂：0.25%胰蛋白酶、I/II型胶原酶、DNase I、M199培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、William E培养基/KSOM培养基、FBS、PBS、肝素
分离纯化步骤
取实验动物肝脏组织，通过门静脉灌注0.25%胰蛋白酶(37度、20分钟)
取出肝脏，剪碎后加入II型胶原酶37度振荡消化45-60分钟
消化液经70um和40um滤网过滤，100g离心5分钟收集肝细胞
采用Percoll不连续密度梯度离心(30%/60%)纯化肝细胞
原代培养要点
肝细胞：使用William E培养基+10%FBS+100nM地塞米松+10ug/mL胰岛素
肝细胞接种后4-6小时开始贴壁，24小时内形成典型多角形上皮样细胞
肝细胞培养3-7天后功能逐渐下降，建议实验在培养7天内完成
肝星状细胞：使用DMEM/F12+10%FBS培养，细胞呈成纤维细胞样生长
常见问题优化
肝细胞活力差：灌注压力控制在10-12mmHg，消化时间严格控制
肝细胞功能丧失：培养基中添加HGF(10ng/mL)和EGF(10ng/mL)可维持肝细胞功能
肝星状细胞活化：传代后细胞逐渐活化，建议冻存早期细胞
大鼠转化生长因子β(TGF-β)elisa试剂盒 | SJSA-1人骨肉瘤细胞 |
大鼠转化生长因子β受体1(TGFBR1)elisa试剂盒 | 小鼠冠状动脉平滑肌细胞 |
大鼠转化生长因子(TGF)elisa试剂盒 | 大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞 |
大鼠转铁蛋白受体1(TFR1)elisa试剂盒 | MLTC-1 (小鼠睾丸间质细胞瘤细胞) (种属鉴定正确) |
大鼠Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)elisa试剂盒 | 人T淋巴细胞白血病细胞C8166(STR鉴定正确) |
大鼠MEK激酶(MEK)elisa试剂盒 | 大鼠主动脉弓内皮细胞 |
猪瘦素（LEP）elisa试剂盒 | 兔胃黏膜上皮细胞 |
RPMI8226人多发性骨髓瘤细胞专用培养基 | ADAM33基因过表达细胞株 |
CTX大鼠脑星形胶质细胞专用培养基 | EME2基因过表达细胞株 |
人原代类风湿关节炎患者软骨细胞专用培养基 | DRC3基因过表达细胞株 |
GH3细胞专用培养基 | ARHGEF16基因过表达细胞株 |
狗原代成骨细胞专用培养基 | AK8基因过表达细胞株 |
人肾足突细胞大鼠原代口腔黏膜成纤维细胞专用培养基 | GLRA1基因过表达细胞株 |
GT1-7细胞专用培养基 | DYRK3基因过表达细胞株 |
取出冻存管，37℃水浴快速解冻，75% 酒精擦拭管壁，送入超净台。
将细胞悬液转移离心管，加入足突细胞专用完全培养基稀释冻存保护剂。
1100‑1200rpm 离心 5min，小心吸弃上清，勿扰动细胞沉淀。
添加完全培养基，轻柔吹打重悬，该细胞较为脆弱，严禁强力吹打。
细胞计数，调节接种密度，接种包被好的培养板 / 瓶。
37℃，5% CO₂培养箱静置孵育，24 小时内不移动。
24h 镜检贴壁，更换培养基去除死细胞，控制汇合度，不建议过度增殖。
