产品名称 | 人神经少突胶质细胞 | 组织来源 | 大脑皮质组织 |
英文名称 | Human Oligodendrocyte Cells | 种属 | 人 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3068 |
方法简介 实验室分离的人神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来。
质量检测 实验室分离的人神经少突胶质细胞经GC（Galactocerebroside）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 人神经少突胶质细胞完全培养基(含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 不传代
传代特性： 不增殖；不传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人神经少突胶质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：健康成人供体，取脑组织或脊髓组织
试剂：0.25%胰蛋白酶、I/II型胶原酶、DNase I、M199培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、DMEM/F12培养基、FBS、EGF、FGF-b、PDGF-AA
分离纯化步骤
取实验动物脑组织或脊髓组织，用预冷PBS冲洗去除血液
去除脑膜和血管组织，将目标区域剪碎至1mm3
用0.25%胰蛋白酶消化20分钟，再加入II型胶原酶消化30分钟
过滤后300g离心8分钟收集细胞，重悬于含EGF和FGF-b的培养基中
采用磁珠分选或差速培养法富集目标胶质细胞类型
原代培养要点
胶质细胞(星形胶质细胞/少突胶质细胞/小胶质细胞)培养条件略有差异
星形胶质细胞：DMEM/F12+10%FBS，37度、5% CO2，细胞呈多角形贴壁生长
少突胶质细胞：需PDGF-AA维持增殖，分化期添加T3、甲状腺素促进成熟
小胶质细胞：采用振荡分选法从混合胶质细胞中分离，悬浮或弱贴壁生长
常见问题优化
胶质细胞交叉污染：采用免疫磁珠分选可提高纯度至90%以上
少突胶质细胞分化率低：添加C57条件培养基或IBMX可促进少突胶质细胞成熟
小胶质细胞活化：避免过度培养，原代培养5代以内保持静息态表型
大鼠总铁结合力(TIBC)elisa试剂盒 | RT4人膀胱移行细胞乳头瘤 |
大鼠Tamm-Horsfall蛋白(THP)elisa试剂盒 | 小鼠支气管上皮细胞 |
大鼠TH糖蛋白(TH)elisa试剂盒 | 大鼠结膜囊成纤维细胞 |
大鼠谷氨酰胺转胺酶1(TGM1)elisa试剂盒 | C2C12 (小鼠成肌细胞) (种属鉴定正确) |
大鼠Klotho蛋白(Klotho)elisa试剂盒 | 人前列腺癌细胞PC-3M(STR鉴定正确) |
大鼠Kruppel样因子6(KLF6)elisa试剂盒 | 兔卵巢表面上皮细胞 |
猪丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）elisa试剂盒 | 大鼠原代骨髓间充质干细胞 |
Raji人淋巴瘤细胞专用培养基 | CHAF1B基因过表达细胞株 |
BRL大鼠肝细胞专用培养基 | EVX2基因过表达细胞株 |
大鼠原代肛门内括约肌平滑肌细胞专用培养基 | FARS2基因过表达细胞株 |
F81细胞专用培养基 | LRRN2基因过表达细胞株 |
鸡原代气管上皮细胞专用培养基 | ALX4基因过表达细胞株 |
人神经少突胶质细胞大鼠原代结肠平滑肌细胞专用培养基 | PLPPR4基因过表达细胞株 |
GBC-SD细胞专用培养基 | AMPD1基因过表达细胞株 |
冻存管 37℃水浴速融，留有极少量冰晶取出，酒精消毒外壁。
无菌将细胞悬液转移离心管，加入少突胶质细胞专用完全培养基。
1000rpm 离心 5min，小心吸弃上清。
神经专用培养基轻柔吹打重悬细胞沉淀，动作尽量温和。
细胞计数，调整接种密度，接种多聚赖氨酸包被培养器皿。
37℃、5% CO₂培养箱静置 48h，禁止晃动。
镜检细胞贴壁突起生长，半换液去除悬浮碎片，观察细胞分化状态。
