人乳腺癌成纤维细胞

人乳腺癌成纤维细胞

采用组织块贴壁法从健康供体的乳腺癌成纤维细胞来源组织中分离成纤维细胞，经 0.25% 胰蛋白酶消化传代后，接种于未包被培养皿中，使用 DMEM 低糖培养基（含 10% FBS、100 U/mL 青霉素和 100 μg/mL 链霉素）培养；通过免疫荧光染色检测成纤维细胞标志物 CD90（Thy-1）、CD44、vimentin 及 FSP-1 表达，结合细胞形态学观察（梭形、长突起 morphology）和碱性磷酸酶（ALP）活性检测确认细胞身份。

产品名称：人乳腺癌成纤维细胞

英文名称： Human Mammary Cancer Fibroblasts

组织来源： 乳腺癌组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人乳腺癌成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人乳腺癌成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人乳腺癌成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人乳腺癌成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管置于 37℃水浴快速解冻，残留少量冰晶取出，酒精消毒外壁。

超净台将细胞悬液转移离心管，加入乳腺癌成纤维细胞完全培养基。

1000rpm 离心 5min，弃上清，去除冻存保护剂。

添加完全培养基，温和吹打重悬细胞沉淀。

细胞计数，调整接种密度接种培养瓶。

放入 37℃、5% CO₂培养箱静置 24h。

镜检贴壁状态，更换新鲜培养基去除漂浮死细胞，继续培养。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.细胞在体外培养过程中需注意维持其分化表型，避免过度传代导致表型丢失。

4.补充10ug/ml胰岛素、5ug/ml转铁蛋白和2nM三碘甲腺原氨酸(T3)。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。