人前列腺平滑肌细胞

人前列腺平滑肌细胞

运用胶原酶消化法从健康供体前列腺平滑肌细胞血管组织中分离平滑肌细胞，经密度梯度离心纯化后接种于胶原 I 包被的培养表面，采用含有 10% FBS 和 5 ng/mL PDGF-BB 的 DMEM/F12 培养基进行体外扩增；通过 Western blot 和免疫荧光双重检测 α-SMA、SM22α、Calponin 及 SM-MHC 表达，并通过细胞迁移实验（Transwell）和收缩功能实验验证平滑肌细胞收缩表型。

产品名称：人前列腺平滑肌细胞

英文名称： Human Prostate Smooth Muscle Cells

组织来源： 前列腺组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人前列腺平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人前列腺平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人前列腺平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人前列腺平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管 37℃水浴速融，微小冰晶残留时取出，75% 酒精消毒外壁。

无菌操作转移细胞悬液至离心管，添加平滑肌细胞完全培养基。

1000rpm 离心 5min，吸走上清，去除 DMSO 冻存保护剂。

加入专用完全培养基，温和吹打重悬细胞沉淀。

细胞计数，调整接种密度后接种培养瓶。

37℃、5% CO₂培养箱静置孵育，24h 内禁止挪动。

次日镜下观察梭形细胞贴壁情况，换液去除悬浮杂质，维持细胞培养。

1.所有试剂需提前预热至37度，冷试剂直接加入会显著降低细胞存活率。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.细胞接种密度对实验结果影响显著，建议根据实验目的优化接种密度参数。

4.培养基中需加入1%胰岛素转铁蛋白硒(ITS)补充剂和10nM地塞米松。

5.建议传代比例为1:2，每2-3天更换新鲜培养基，维持细胞最佳生长状态。