人脑成纤维细胞

人脑成纤维细胞

从健康供体脑成纤维细胞组织标本经机械分离与胶原酶 II 联合消化获取成纤维细胞，经差速贴壁法纯化后接种于纤维连接蛋白包被培养皿中，采用 DMEM/F12 完全培养基（含 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺及 1% 非必需氨基酸）维持培养；通过免疫荧光检测 FSP-1/S100A4、α-SMA（活化型）及 PDGFR-β 表达，Western blot 分析细胞外基质蛋白（胶原 I、纤连蛋白）分泌水平，确认成纤维细胞功能表型。

产品名称：人脑成纤维细胞

英文名称： Human Brain Fibroblasts

组织来源： 大脑皮质组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人脑成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人脑成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人脑成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人脑成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞复苏：人脑成纤维细胞特异性高，温和低损复苏。37℃解冻，消毒后移入神经成纤维专用培养基，1000rpm离心5min，重悬接种，静置24h。

细胞换液：复苏24h首次换液，后续每48h换液，轻柔清洗，维持梭形规整形态。

细胞传代：细胞融合度90%传代，胰酶消化2min，按1:3比例传代，增殖稳定无变异。

细胞消化：标准温和消化，轻柔吹打分散细胞，无破损、无老化。

细胞冻存：冻存液85%神经培养基+10%FBS+5%DMSO，细胞密度8×10⁵个/mL，常规冻存。

细胞接种：接种密度6×10³个/cm²，静置6h贴壁，均匀舒展生长。

细胞质控：细胞细长梭形、排列整齐、无神经细胞杂化，无菌无污染，适用于脑部微环境、神经损伤修复研究。

1.取材时需仔细去除血管或器官表面的脂肪组织和结缔组织，仅保留平滑肌层，操作时间控制在20分钟以内。

2.培养器皿无需特殊包被，普通培养板即可支持平滑肌细胞贴壁，但用纤连蛋白包被可增强细胞贴附。

3.平滑肌细胞增殖速度中等，约3-4天换液一次，融合后呈峰谷状排列(蜂窝样)为典型特征。

4.在DMEM培养基中补充10-20%FBS及1%青霉素-链霉素即可满足生长需求，必要时添加10ng/ml EGF。

5.培养期间每48小时换液，若发现细胞由梭形变为多角形可能提示表型转换，需调整实验时间窗。