人卵巢颗粒细胞

人卵巢颗粒细胞

基于原代组织酶消化法从健康供体卵巢颗粒细胞组织标本获取单细胞悬液，经密度梯度离心和免疫磁珠分选（MACS）双重纯化后，接种于 Matrigel 或胶原包被的培养表面，使用优化配方的专用培养基（含 10% FBS、特定细胞因子及添加剂）培养；通过多组学鉴定策略（免疫荧光/流式/转录组）确认细胞身份，并采用功能实验验证其生物学活性。

产品名称：人卵巢颗粒细胞

英文名称： Human Ovarian Granulosa Cells

组织来源： 卵巢组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人卵巢颗粒细胞采用先机械分离，而后胶原酶消化，最后差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人卵巢颗粒细胞经FSHR免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）

培养基： 人卵巢颗粒细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 上皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传1-2代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人卵巢颗粒细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞复苏：卵巢颗粒细胞功能特异性高、增殖弱，超温和复苏。37℃慢速解冻，消毒后移入颗粒细胞专用培养基，1000rpm离心5min，极轻柔重悬，静置48h贴壁。

细胞换液：复苏48h首次换液，后续每72h换液，补充激素相关营养，维持内分泌功能活性。

细胞传代：细胞满壁融合后传代，低浓度消化液消化5min，按1:2极低比例传代，严控传代次数，保留分泌功能。

细胞消化：低损伤消化，避免破坏激素分泌功能，轻柔操作，最大限度保留细胞活性。

细胞冻存：高血清保护冻存，92%FBS+8%DMSO，细胞密度6×10⁵个/mL，慢速冻存保护功能。

细胞接种：高密度接种9×10³个/cm²，依赖细胞间信号维持功能，静置8h贴壁。

细胞质控：细胞形态圆润规整、排列致密、分泌功能稳定，无老化凋亡，无菌无污染，适用于卵巢内分泌、卵泡发育研究。

1.血管组织取材后需立即置于冰预冷的M199培养基中运输，尽快去除外膜结缔组织和脂肪组织。

2.使用纤维连接蛋白(10ug/ml)包被培养器皿可显著改善内皮细胞贴壁速度和铺展形态。

3.该细胞体外可传10-15代，建议采用低代次细胞进行实验，高代次细胞可能出现表型漂移和凝集素摄取能力下降。

4.培养基中需添加EGM-2内皮细胞生长添加剂套装，包含VEGF、FGF-b、EGF和hydrocortisone等关键生长因子。

5.换液前预先检查培养基pH和颜色，若培养基过早变黄提示需缩短换液间隔至24小时。