人骨髓来源巨噬细胞

人骨髓来源巨噬细胞

运用 Percoll 密度梯度离心法从健康供体骨髓来源巨噬细胞外周血或组织中提取单个核细胞，经免疫磁珠分选（MACS）或流式分选（FACS）纯化目标免疫细胞亚群后，接种于纤连蛋白包被的培养表面，使用含细胞因子（IL-4、IL-13 或 GM-CSF）的 IMDM 培养基培养；通过流式细胞术多色分析 CD11c、MHC-II、CD80/86 等共刺激分子表达谱，结合 ELISA 检测细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10）分泌水平鉴定免疫细胞功能表型。

产品名称：人骨髓来源巨噬细胞

英文名称： Human Bone Marrow-Derived Macrophages

组织来源： 腿骨髓组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人骨髓来源巨噬细胞采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来。

质量检测  实验室分离的人骨髓来源巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人骨髓来源巨噬细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 巨噬细胞样

传代比例： 不传代

传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液： 利多卡因（12 mM）

人骨髓来源巨噬细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

骨髓单核细胞悬液接种培养板，添加 M-CSF 巨噬细胞诱导因子。

37℃恒温培养 5 天，每 2 天补充含诱导因子新鲜培养基。

观察细胞形态由圆形单核转为梭形、多边形巨噬细胞。

去除未分化悬浮淋巴细胞，PBS 洗涤细胞单层 2 次。

可给予 LPS 刺激构建炎症极化 M1 巨噬细胞模型。

消化收集细胞用于流式、吞噬功能、细胞因子检测实验。

CD68 标志物染色鉴定巨噬细胞纯度，用于骨髓免疫炎症研究。

1.全程操作需在超净工作台内无菌条件下进行，任何污染风险均可能导致实验失败。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.细胞在体外培养过程中需注意维持其分化表型，避免过度传代导致表型丢失。

4.补充10ug/ml胰岛素、5ug/ml转铁蛋白和2nM三碘甲腺原氨酸(T3)。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。