人骨髓单个核细胞

人骨髓单个核细胞

基于原代组织酶消化法从健康供体骨髓单个核细胞组织标本获取单细胞悬液，经密度梯度离心和免疫磁珠分选（MACS）双重纯化后，接种于 Matrigel 或胶原包被的培养表面，使用优化配方的专用培养基（含 10% FBS、特定细胞因子及添加剂）培养；通过多组学鉴定策略（免疫荧光/流式/转录组）确认细胞身份，并采用功能实验验证其生物学活性。

产品名称：人骨髓单个核细胞

英文名称： Human Bone Marrow Mononuclear Cells

组织来源： 腿骨髓组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来。

质量检测  实验室分离的人骨髓单个核细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人骨髓单个核细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 半贴壁半悬浮

细胞形态： 圆形

传代比例： 不传代

传代特性： 不增殖；不传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人骨髓单个核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

无菌抽取人新鲜骨髓样本，预冷 PBS 等体积稀释骨髓原液混匀。

缓慢叠加至淋巴细胞分离液上层，保持液面分层清晰不混合。

水平离心机 2000r/min 离心 20min，离心结束可见乳白色单核细胞层。

吸取中间白层细胞，加入 PBS 洗涤细胞沉淀 2 次去除分离液残留。

完全培养基重悬细胞，计数后按需接种培养或直接冻存。

短期培养 24h 去除贴壁基质细胞，获得高纯度悬浮单个核细胞。

可进一步分选单核、淋巴亚群，用于免疫、干细胞诱导实验。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.培养板需预先用胶原I型(50ug/ml)包被过夜，以增强细胞贴壁能力。

3.培养过程中需注意CO2浓度维持在5%正负0.5%，pH值保持在7.2-7.4范围内。

4.培养基中需加入1%胰岛素转铁蛋白硒(ITS)补充剂和10nM地塞米松。

5.使用人源组织标本需获得伦理委员会批准及患者知情同意，操作需符合生物安全规范。 细胞长至80-90%融合时进行传代，用0.25%胰蛋白酶消化后按1:3比例扩培。