产品名称 | 人骨骼肌细胞 | 组织来源 | 骨骼肌组织 |
英文名称 | Human Skeletal Muscle Cells | 种属 | 人 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3004 |
方法简介 实验室分离的人骨骼肌细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来。
质量检测 实验室分离的人骨骼肌细胞经α-Sarcomeric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 人骨骼肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人骨骼肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：健康成人供体，取腓肠肌/心肌等目标肌肉组织
试剂：0.25%胰蛋白酶、I/II型胶原酶、DNase I、M199培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、DMEM/F12培养基、FBS、PBS、胰岛素
分离纯化步骤
取实验动物目标肌肉组织，用预冷PBS冲洗去除血液和结缔组织
剪碎组织后先经机械法分散，再加入0.25%胰蛋白酶37度消化15分钟
加入II型胶原酶继续消化30-40分钟，期间振荡2-3次
过滤后300g离心8分钟收集细胞沉淀
采用差速贴壁法或Percoll密度梯度离心纯化肌源性细胞
原代培养要点
骨骼肌细胞：使用DMEM+20%FBS培养基培养肌源性干细胞，换用2%FBS诱导分化
心肌细胞：使用M199+20%FBS培养基，37度、5% CO2培养，细胞呈节律性搏动
肌卫星细胞可在培养7-10天后融合形成多核肌管(Myotube)
心肌细胞培养需注意电刺激培养可促进成熟和同步搏动
常见问题优化
肌细胞融合率低：降低培养皿FBS浓度至2%可促进肌管形成
心肌细胞搏动不协调：使用电刺激培养装置(1Hz，2ms脉冲)可促进同步搏动
成纤维细胞污染：采用Pre-plating差速贴壁法2-3次可有效富集肌源性细胞
大鼠滋养层细胞表面抗原2(Trop-2)elisa试剂盒 | MHCC-97H+luc人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记 |
大鼠酪氨酸激酶A(TrkA)elisa试剂盒 | 大鼠中耳上皮细胞 |
大鼠转铁蛋白(TRF)elisa试剂盒 | 大鼠前脂肪细胞 |
大鼠髓细胞触发受体1(TREM1)elisa试剂盒 | FHs 74 Int (人小肠上皮细胞) |
大鼠DEK蛋白(DEK)elisa试剂盒 | 甲氨蝶呤诱导HT29细胞分化为成熟杯状细胞HT29-MTX-E12(STR鉴定正确) |
大鼠deta6去饱和酶(Deta6ase)elisa试剂盒 | 兔颈动脉内皮细胞 |
猪吻素（Kp）elisa试剂盒 | 人原代输尿管平滑肌细胞 |
C6+LUC大鼠脑胶质瘤绿色荧光标记细胞专用培养基 | MTMR10基因过表达细胞株 |
MFC小鼠前胃癌细胞专用培养基 | DAZ2基因过表达细胞株 |
大鼠原代嗅鞘细胞专用培养基 | ESRRG基因过表达细胞株 |
CCRF-CEM细胞专用培养基 | CCNE2基因过表达细胞株 |
人原代肺动脉高压血管内皮细胞专用培养基 | EFS基因过表达细胞株 |
人骨骼肌细胞大鼠原代大隐静脉内皮细胞专用培养基 | F2RL3基因过表达细胞株 |
CHOGROWCD2培养基 | FCAMR基因过表达细胞株 |
无菌取四肢骨骼肌组织，剔除筋膜、血管、脂肪，剪碎肌肉组织。
胰酶 + 胶原酶混合液 37℃分次消化，分次收集肌细胞悬液。
差速贴壁去除成纤维细胞，纯化骨骼肌肌细胞悬液。
肌细胞专用含谷氨酰胺培养基重悬，接种多聚赖氨酸包被板。
24h 半换液清除漂浮破碎细胞，每 2 天更换新鲜培养基。
细胞融合 90% 诱导肌管分化；传代消化力度轻柔，避免肌膜破损。
用于肌肉损伤、肌萎缩、运动细胞生物学相关体外实验。
