人腹膜间皮细胞

人腹膜间皮细胞

运用胶原酶 I 消化法从健康供体腹膜间皮细胞组织中提取间充质成分，经密度梯度离心去除血液细胞后，接种于胶原 IV 包被的培养表面，使用含 10% FBS 的 DMEM/F12 培养基培养；通过流式细胞术分析 CD90+、CD44+、CD105+ 阳性率及 CD34-、CD45- 阴性率，免疫荧光染色显示 vimentin 强阳性、角蛋白阴性，并经成纤维细胞集落形成实验验证增殖能力。

产品名称：人腹膜间皮细胞

英文名称： Human Peritoneal Mesothelial Cells

组织来源： 腹膜组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来。

质量检测  实验室分离的人腹膜间皮细胞经PCK和Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培养基： 人腹膜间皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传1-2代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人腹膜间皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

无菌采集腹腔冲洗液或腹膜薄层组织，PBS 稀释去除腹腔黏液与血细胞。

0.05% 胰酶低温消化腹膜组织 30min，温和解离表层间皮细胞。

过滤收集细胞悬液，900r/min 离心 5min，弃上清，间皮细胞专用培养基重悬。

细胞悬液接种培养瓶，静置培养 36h，等待多边形间皮细胞贴壁。

半换液清除漂浮巨噬细胞、血细胞，每 2 天完整更换培养基。

细胞融合 90% 进行传代，消化后轻柔吹打，防止间皮细胞膜破损。

细胞可短期无血清培养用于损伤修复、腹膜纤维化模型构建。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.细胞在体外培养过程中需注意维持其分化表型，避免过度传代导致表型丢失。

4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。

5.细胞融合度达到70-80%时传代，胰酶消化时间控制在1-2分钟避免过度消化。