人成骨细胞

人成骨细胞

从健康供体长骨骨膜或骨组织经胶原酶 I/II 联合消化获取骨细胞，经差速贴壁纯化后接种于玻连蛋白包被的培养皿中，使用含 10% FBS 的 DMEM/F12 培养基培养；通过免疫荧光检测骨细胞标志物 E11/gp38、Piezo1、SOST（硬化蛋白）及 DMP1 表达，并采用共培养体系与破骨细胞前体细胞共培养验证成骨-破骨偶联信号传导功能。

产品名称：人成骨细胞

英文名称： Human Osteoblasts

组织来源： 颅骨组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人成骨细胞采用先用胰蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来。

质量检测  实验室分离的人成骨细胞经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人成骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人成骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

骨组织处理：无菌取人松质骨，PBS 冲洗去除骨髓、血细胞

连续酶解：分次胶原酶消化骨片，分次收集释放的成骨细胞

骨片共培养：剩余骨片平铺培养瓶，组织块爬出补充成骨细胞

成骨扩增培养：高钙完全培养基扩增细胞，去除破骨杂细胞

矿化诱导：添加 β- 甘油磷酸钠、维生素 C 诱导骨结节矿化

成骨活性检测：茜素红染色观察矿化结节，检测碱性磷酸酶活性

细胞冻存：未矿化增殖期成骨细胞分装液氮保存

1.目标组织取材后迅速置于含青霉素-链霉素的Hanks液中运输，尽快分离平滑肌组织块。

2.培养器皿需提前用0.1mg/ml多聚赖氨酸包被过夜，未包被的培养板细胞贴壁效率极低。

3.平滑肌细胞增殖速度中等，约3-4天换液一次，融合后呈峰谷状排列(蜂窝样)为典型特征。

4.培养基中添加20%胎牛血清和10ng/ml血小板衍生生长因子(PDGF)可显著促进平滑肌细胞增殖。

5.细胞长至80-90%融合时进行传代，用0.25%胰蛋白酶消化后按1:3比例扩培。