鸡外周血淋巴细胞

鸡外周血淋巴细胞

采用密度梯度离心法从来航鸡的外周血淋巴细胞来源血液或组织中分离免疫细胞，经 NH₄Cl 裂解红细胞后，接种于未包被培养皿中，使用 RPMI-1640 培养基（含 10% FBS、1% 双抗及 10 ng/mL M-CSF/G-CSF）培养；通过流式细胞术检测 CD11b、F4/80（大鼠）、CD14、CD86 等巨噬细胞/免疫细胞标志物表达，结合 MTT 增殖实验和吞噬功能实验（荧光微球吞噬 assay）验证免疫细胞活性与功能。

产品名称：鸡外周血淋巴细胞

英文名称： Chicken Peripheral Blood Lymphocytes

组织来源： 外周血

默认种属 ：三黄鸡

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的鸡外周血淋巴细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来。

质量检测  实验室分离的鸡外周血淋巴细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 鸡外周血淋巴细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 悬浮

细胞形态： 圆形

传代比例： 不传代

传代特性： 不增殖；不传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

鸡外周血淋巴细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

血液预处理：抗凝全血与等体积 PBS 稀释，轻柔混匀降低血液黏度

分层离心：缓慢叠加淋巴细胞分离液，低速无制动离心分层

白膜收集：小心吸取云雾状淋巴细胞层，避免吸入红细胞与分离液

多次洗涤：含 1% BSA 的 PBS 重悬离心 3 次，彻底去除污染红细胞

活化培养：完全培养基重悬，加入 ConA 刺激淋巴细胞增殖活化

增殖检测铺板：调整细胞浓度铺 96 孔板，用于细胞免疫实验

短期保存：未活化淋巴细胞冻存，活化细胞 48h 内完成检测实验

1.全程操作需在超净工作台内无菌条件下进行，任何污染风险均可能导致实验失败。

2.培养板需预先用胶原I型(50ug/ml)包被过夜，以增强细胞贴壁能力。

3.细胞在体外培养过程中需注意维持其分化表型，避免过度传代导致表型丢失。

4.补充10ng/ml表皮生长因子(EGF)和20ng/ml胰岛素样生长因子(IGF-1)。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。