大鼠子宫内膜基质细胞

大鼠子宫内膜基质细胞

采用组织块贴壁法从Sprague-Dawley大鼠的子宫内膜基质细胞来源组织中分离目标细胞，经胶原酶 II 和 Dispase 联合消化后，通过密度梯度离心纯化目标细胞组分，接种于特异性包被（如胶原 I/明胶/多聚赖氨酸）的培养表面，使用组织特异性培养基（含 10% FBS 及针对性生长因子）培养；通过免疫荧光染色检测细胞类型特异性标志物表达，结合倒置显微镜形态学观察和分子生物学方法（RT-qPCR/Western blot）验证细胞身份与功能特性。

产品名称：大鼠子宫内膜基质细胞

英文名称： Rat Endometrial Stromal Cells

组织来源： 子宫组织

默认种属 ：SD大鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的大鼠子宫内膜基质细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的大鼠子宫内膜基质细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 大鼠子宫内膜基质细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传3代左右

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大鼠子宫内膜基质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

取出大鼠子宫角，纵向剖开子宫壁，刮取子宫内膜组织，剔除子宫肌层组织。

子宫内膜组织剪碎后，先胰酶短时间消化去除表层上皮细胞，弃第一次消化上清。

沉淀组织加入 0.1% 胶原酶继续消化 40min，释放内膜基质细胞。

过滤消化液，离心收集细胞，利用差异贴壁法：基质细胞 2h 快速贴壁，上皮细胞悬浮。

吸走未贴壁上皮细胞，更换基质细胞专用培养液继续培养贴壁细胞。

每 2 日换液扩增细胞，观察细胞呈梭形分散生长形态。

经 Vimentin 阳性、CK 阴性鉴定，获得高纯度子宫内膜基质细胞。

1.手术获取组织后需立即在显微镜下剥离平滑肌层，避免成纤维细胞等杂细胞过度污染。

2.使用0.1%明胶包被培养皿可改善平滑肌细胞贴壁效率，尤其在原代培养初期效果显著。

3.平滑肌细胞增殖速度中等，约3-4天换液一次，融合后呈峰谷状排列(蜂窝样)为典型特征。

4.培养基中添加20%胎牛血清和10ng/ml血小板衍生生长因子(PDGF)可显著促进平滑肌细胞增殖。

5.培养期间每48小时换液，若发现细胞由梭形变为多角形可能提示表型转换，需调整实验时间窗。