大鼠胰腺腺泡细胞

运用胶原酶消化-差速贴壁联合策略从Sprague-Dawley大鼠胰腺腺泡细胞组织中分离纯化目标细胞,经 Percoll 密度梯度离心去除杂细胞后接种于纤维连接蛋白包被培养皿中,采用含多种添加剂的专用培养基维持培养;通过流式细胞术分析表面标志物表达谱,免疫荧光染色验证特异性蛋白表达,并结合功能实验(如分泌功能检测、信号通路分析)综合鉴定细胞类型。

产品名称:大鼠胰腺腺泡细胞
英文名称: Rat Pancreatic Acinar Cells
组织来源: 胰腺组织
默认种属 :SD大鼠
产品规格:5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的大鼠胰腺腺泡细胞采用胶原酶消化法制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠胰腺腺泡细胞经亚甲基蓝染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基: 大鼠胰腺腺泡细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 短梭形、多角形
传代比例: 不传代
传代特性: 不增殖;不传代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠胰腺腺泡细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

快速摘取新鲜胰腺,冰浴缓冲液冲洗,切碎胰腺组织后用低浓度胶原酶短时消化腺泡。
梯度离心纯化腺泡团块,腺泡细胞对机械剪切力极敏感,吹打动作必须极其轻柔。
使用富含氨基酸的腺泡专用培养液悬浮培养,不可贴壁长时间培养,贴壁易快速失活。
检测淀粉酶分泌水平,验证腺泡细胞外分泌生理功能是否完好。
可给予雨蛙肽刺激构建急性胰腺炎细胞模型,观察细胞损伤与炎症因子释放。
实验操作全程控制温度,室温放置超过 30min 腺泡活性会显著下降。
该细胞体外难以长期传代与冻存,分离后务必当日完成相关功能检测。

1.操作过程需保持低温环境,室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。
2.使用未包被的常规培养瓶即可,成纤维细胞贴壁能力强,一般在24小时内即可见细胞从组织块边缘迁出。
3.成纤维细胞体外增殖能力强,传代比例1:3至1:5,细胞融合达80-90%时需及时传代防止过度融合。
4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。
5.实验选用SD大鼠或Wistar大鼠,年龄和体重需符合实验标准要求。 培养期间注意观察是否有成纤维细胞过度生长压制其他细胞类型的情况,必要时使用选择性培养基。

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