产品名称 | 大鼠胰岛β细胞 | 组织来源 | 胰腺组织 |
英文名称 | Rat Pancreatic Islet β Cells | 种属 | SD大鼠 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3266 |
方法简介 实验室分离的大鼠胰岛β细胞采用先用胶原酶消化分离得到胰岛、再用胰酶逐级消化胰岛制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠胰岛β细胞经Insulin含量检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 大鼠胰岛β细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 不传代
传代特性： 不建议传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠胰岛β细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：SD大鼠，取胰腺/睾丸/肾上腺等内分泌腺体
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM/F12培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、DMEM/F12培养基、FBS、PBS
分离纯化步骤
取实验动物目标内分泌腺体组织，仔细去除周围结缔组织
剪碎组织后采用胶原酶消化法(37度、45-60分钟)分散细胞
经滤网过滤后，采用密度梯度离心纯化目标细胞
胰岛细胞可采用Handy solution差速沉淀法进一步纯化
原代培养要点
胰岛beta细胞：使用CMRL-1640+10%FBS+10mM HEPES+50uM beta-巯基乙醇
睾丸间质细胞：使用DMEM/F12+10%FBS+0.1% BSA培养
肾上腺皮质细胞：使用DMEM/F12+5%FBS+0.1uM地塞米松培养
常见问题优化
胰岛细胞纯度不高：采用Handy solution梯度离心可获得纯度>90%的胰岛细胞
内分泌细胞功能维持：添加相应激素(如IGF-1、IGF-2)可维持细胞功能
细胞存活率低：培养基中添加抗坏血酸和转铁蛋白可提高存活率
大鼠UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A4(UGT1A4)elisa试剂盒 | HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞 |
大鼠UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A(UGT1A)elisa试剂盒 | 大鼠肾周细胞 |
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)elisa试剂盒 | 大鼠肠神经胶质细胞 |
大鼠脲酶(UE)elisa试剂盒 | TT (人甲状腺导管癌细胞) (STR鉴定正确) |
大鼠C4结合蛋白(C4BP)elisa试剂盒 | 人眼脉络黑色素瘤细胞OCM1A(STR鉴定正确) |
大鼠Ca2+ATP酶(Ca2+ATPase)elisa试剂盒 | 小鼠脂肪微血管内皮细胞 |
猪血管紧张素ІІ（Ang ІІ）elisa试剂盒 | 大鼠原代膀胱平滑肌细胞 |
NCTC1469（NCTC CLONE 1469）小鼠正常肝细胞专用培养基 | COQ2基因过表达细胞株 |
CT26小鼠结肠癌细胞专用培养基 | CES4A基因过表达细胞株 |
大鼠原代耳软骨细胞专用培养基 | BFSP1基因过表达细胞株 |
AR42J细胞专用培养基 | ADRA2B基因过表达细胞株 |
人原代胶质瘤细胞专用培养基 | SYN1基因过表达细胞株 |
大鼠胰岛β细胞TTA1细胞专用培养基 | ZBTB39基因过表达细胞株 |
AtT-20细胞专用培养基 | GDF9基因过表达细胞株 |
无菌摘取大鼠胰腺，灌注胶原酶 P 溶液对胰腺原位消化，水浴震荡消化后分离纯化胰岛团。
在体视显微镜下手工挑取完整胰岛，剔除外分泌腺组织杂质，将挑好胰岛转入低黏附培养皿悬浮培养。
使用含葡萄糖的专用胰岛培养基孵育胰岛，促使胰岛内部 β 细胞维持胰岛素分泌功能。
若需单细胞 β 细胞，用胰酶温和解离胰岛团，过筛获得单细胞悬液，避免过度消化损伤分泌颗粒。
采用流式分选标记 Insulin 阳性细胞，精准富集胰岛 β 细胞，去除 α、δ 等其他胰岛内分泌细胞。
低糖、高糖梯度刺激实验检测胰岛素分泌能力，验证 β 细胞生理活性。
细胞冻存难度较高，建议分离后立即开展功能实验，短期保存使用胰岛专用保存液 4℃暂存。
