大鼠嗅上皮细胞

基于组织块贴壁法从Sprague-Dawley大鼠的嗅上皮细胞来源组织中获取初始细胞,经 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 传代后,采用特异性上皮细胞培养体系(K-SFM 基础培养基 supplemented with bovine pituitary extract)维持培养;通过免疫荧光双标技术检测 E-cadherin/CK5 共表达,Western blot 分析上皮标志蛋白表达谱,并结合Transwell模型评估细胞极化和紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin)的定位表达。

产品名称:大鼠嗅上皮细胞
英文名称: Rat Olfactory Epithelial Cells
组织来源: 嗅上皮组织
默认种属 :SD大鼠
产品规格:5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的大鼠嗅上皮细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠嗅上皮细胞经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠嗅上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 不传代
传代特性: 属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠嗅上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

打开大鼠鼻腔,刮取鼻腔嗅黏膜上皮薄层组织,避免刮取深部结缔组织。
将嗅上皮组织剪碎,Dispase 酶消化上皮层与固有层连接结构。
吹打分离上皮细胞,离心收集细胞沉淀并洗涤两次。
接种于胶原包被培养皿,采用上皮细胞无血清培养基培养。
3 天后换液去除成纤维污染细胞,观察上皮细胞片状生长形态。
角蛋白染色鉴定嗅上皮细胞标志物表达。
构建嗅觉上皮损伤模型,探究嗅觉上皮修复再生规律。

1.取材时需尽量去除脂肪组织和坏死组织,将目标组织剪成1-2mm3小块后用酶消化法或组织块法进行原代培养。
2.培养皿经常规消毒处理即可使用,成纤维细胞对培养表面要求不高,贴壁速度快。
3.该细胞增殖迅速,原代培养2-3周可获得足够细胞,传代后可维持培养15-20代左右。
4.培养基中添加10-15%胎牛血清即可满足成纤维细胞生长需求,高血清浓度可加速细胞增殖。
5.换液时用PBS洗涤可减少培养基中积累的代谢废物,有利于维持细胞健康状态。

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