产品名称 | 大鼠嗅球神经元细胞 | 组织来源 | 嗅球组织 |
英文名称 | Rat Olfactory Bulb Neurons | 种属 | SD大鼠 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3256 |
方法简介 实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 大鼠嗅球神经元细胞完全培养基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
大鼠嗅球神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：SD大鼠，需快速取材以保证神经元活力
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM/F12培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、Neurobasal培养基、B27添加剂、NGF、BDNF、NT-3、聚赖氨酸、脑基质胶
分离纯化步骤
取实验动物目标脑区/脊髓/神经组织，用预冷无钙镁PBS仔细冲洗
在显微镜下仔细分离目标区域，去除血管和膜组织，剪碎至1mm3
用0.25%胰蛋白酶在37度消化15-20分钟，加入DNase I辅助消化
用含FBS的DMEM终止消化，移液器轻柔吹打制成单细胞悬液
经40um滤网过滤后，300g离心5分钟收集神经元细胞
原代培养要点
将神经元细胞接种于聚赖氨酸包被的盖玻片或培养皿中，使用Neurobasal+B27培养基
接种密度建议1-2x10^5 cells/cm2，37度、5% CO2、95%湿度培养
神经元培养需添加NGF(10ng/mL)、BDNF(10ng/mL)等神经营养因子
7-14天后可观察到明显的神经元突起生长，21天后形成神经网络
常见问题优化
神经元存活率低：培养基中添加GlutaMAX和丙酮酸钠可提高神经元存活率
胶质细胞过度生长：使用Ara-C(10uM)处理可抑制胶质细胞增殖
神经元突起生长不良：添加NGF、BDNF等神经营养因子，使用脑基质胶包被基底
大鼠非羧化骨钙素(uOC)elisa试剂盒 | BEWO人胎盘绒毛膜癌细胞 |
大鼠尿调蛋白(UMOD)elisa试剂盒 | 大鼠肛门内括约肌平滑肌细胞 |
大鼠超敏胰岛素(U-INS)elisa试剂盒 | 人脾脏单核细胞 |
大鼠UDP葡萄糖醛酸转移酶2家族多肽B1(UGT2B1)elisa试剂盒 | MDA-MB-468 (人乳腺癌细胞) (STR鉴定正确) |
大鼠B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-XL)elisa试剂盒 | 人卵巢癌腺癌细胞NIH:OVCAR-3(STR鉴定正确) |
大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa试剂盒 | 兔宫颈上皮细胞 |
猪血红素加氧酶-1（HO1）elisa试剂盒 | 小鼠原代骨髓间充质干细胞 |
MEF(丝裂霉素C处理)小鼠胚胎成纤维细胞专用培养基 | CCDC177基因过表达细胞株 |
sv-huc-1人膀胱上皮永生化细胞专用培养基 | COLQ基因过表达细胞株 |
兔原代小肠粘膜上皮细胞专用培养基 | ADRA2B基因过表达细胞株 |
AAV-293细胞专用培养基 | GBP2基因过表达细胞株 |
人原代结直肠癌相关成纤维细胞专用培养基 | ACVR2A基因过表达细胞株 |
大鼠嗅球神经元细胞TE-1 细胞专用培养基 | GCNA基因过表达细胞株 |
alphaTC1clone6细胞专用培养基 | GALNT8基因过表达细胞株 |
精细分离大鼠双侧嗅球组织，小心剥离外层软脑膜血管。
用神经组织专用消化酶温和消化嗅球组织，避免损伤神经元活性。
轻柔吹打得到单细胞悬液，滤网过滤大块组织残渣。
接种于多聚赖氨酸包被板，使用神经元维持培养基培养。
培养 24h 后换液，抑制胶质细胞过度增殖。
观察嗅球神经元树突分支生长与突触形成过程。
记录嗅觉相关神经元电活动，开展嗅觉信号传导机制研究。
