大鼠神经少突胶质细胞

大鼠神经少突胶质细胞

运用酶消化-摇床振荡联合法从Sprague-Dawley大鼠神经少突胶质细胞新生鼠脑组织中分离原代胶质细胞，经密度梯度离心纯化后接种于纤连蛋白包被的培养表面，使用含 10% FBS 和 20 ng/mL PDGF-AA 的 DMEM/F12 培养基培养少突胶质前体细胞；通过免疫荧光检测 NG2、Olig2、PDGFR-α 表达，Western blot 分析 MBP（髓鞘碱性蛋白）和 CNPase 分化标志物，并经诱导分化实验验证髓鞘形成潜能。

产品名称：大鼠神经少突胶质细胞

英文名称： Rat Oligodendrocyte Cells

组织来源： 大脑皮质组织

默认种属 ：SD大鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞经GC（Galactocerebroside）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）

培养基： 大鼠神经少突胶质细胞完全培养基(含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 不传代

传代特性： 不增殖；不传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大鼠神经少突胶质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

实验准备：配制少突胶质细胞成熟培养基，准备无菌耗材、消化液，提前包被培养板，选取大鼠中枢神经白质组织。

无菌取材：无菌分离大鼠大脑、脊髓白质组织，彻底剔除神经元、血管及结缔组织，预冷PBS漂洗。

组织处理：精细剪碎白质组织，松散纤维结构，便于胶质细胞解离提取。

酶解消化：复合温和消化液37℃消化22min，轻柔震荡，释放成熟少突胶质细胞。

纯化离心：血清终止消化，过滤除渣，1200rpm离心5min，收集纯净少突胶质细胞。

接种培养：成熟胶质细胞培养基重悬接种，恒温静置贴壁培养。

常规养护：48h换液去除杂细胞，每3天换液一次，稳定细胞髓鞘形成能力，用于神经髓鞘实验。

1.所有试剂需提前预热至37度，冷试剂直接加入会显著降低细胞存活率。

2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。

3.该细胞类型体外培养寿命有限，原代细胞通常在5-10代内出现衰老现象。

4.培养基中需添加20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持细胞增殖活性。

5.该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。