大鼠前列腺上皮细胞

大鼠前列腺上皮细胞

采用Ⅱ型胶原酶联合 Dispase 对Sprague-Dawley大鼠的前列腺上皮细胞进行原代消化分离，经密度梯度离心纯化后接种于明胶预包被的培养皿中，使用 Keratinocyte-SFM 培养基（含 EGF 和 B27 添加剂）在 37°C、5% CO₂ 条件下培养；通过免疫荧光染色检测角蛋白（Keratin）5/8、细胞角蛋白 14（KRT14）及 E-cadherin 等上皮细胞特异性标志物表达，结合倒置显微镜观察细胞贴壁后呈铺路石样多边形 morphology 特征

产品名称：大鼠前列腺上皮细胞

英文名称： Rat Prostate Epithelial Cells

组织来源： 前列腺组织

默认种属 ：SD大鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的大鼠前列腺上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、后胶原酶-胰蛋白酶联合消化并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的大鼠前列腺上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培养基： 大鼠前列腺上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 上皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传1-2代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大鼠前列腺上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

实验准备：配制上皮细胞专用无血清培养基，准备无菌缓冲液、专用消化液，提前包被培养器皿，选取大鼠前列腺腺泡组织。

无菌取材：无菌摘取前列腺组织，剔除间质平滑肌、脂肪及血管组织，保留完整腺泡上皮组织，PBS漂洗去污。

组织处理：剪碎腺泡组织，轻柔剥离上皮组织，尽量去除间质杂质，保证上皮细胞纯度。

酶解消化：专用上皮消化液37℃温和消化20min，轻柔震荡，避免上皮细胞破损死亡。

纯化离心：培养基终止消化，过滤纯化，1200rpm离心5min，收集纯净前列腺上皮细胞沉淀。

接种培养：无血清上皮培养基重悬细胞，适宜密度接种，恒温培养箱静置贴壁生长。

常规养护：24h首次换液，后续每2天换液一次，严格无血清培养，抑制成纤维细胞杂增殖。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.培养皿经常规消毒处理即可使用，成纤维细胞对培养表面要求不高，贴壁速度快。

3.成纤维细胞体外增殖能力强，传代比例1:3至1:5，细胞融合达80-90%时需及时传代防止过度融合。

4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。

5.换液时用PBS洗涤可减少培养基中积累的代谢废物，有利于维持细胞健康状态。