19-羟基蟾毒灵39844-86-5

19-羟基蟾毒灵：一种从多种植物来源中提取得到的天然产物，具有抗炎、抗菌、抗病毒等多种药理活性。

中文名称： 19-羟基蟾毒灵
英文名称:19-Hydroxybufalin

分子量:402.53

储存条件:2-8℃

结构类型:强心苷及其苷元

来源:中华大蟾蜍

分析方法: HPLC-DAD or/and HPLC-ELSD

贮存条件：4℃冷藏、密封、避光

有效期：２年

英文别名:(3β,5β)-3,14,19-Trihydroxybufa-20,22-dienolide

分子式:C24H34O5

鉴定方法: 质谱（Mass）, 核磁（NMR）
理化性质：

外观：无色棱柱状结晶，易升华

密度：1.05±0.1 g/cm³

沸点：207‑210 ℃（常压）

闪点：165±15 ℃（闭杯）

折射率：1.580

溶解性：溶于甲醇、乙醇、DMSO；微溶于水；易溶于碱性溶液

稳定性：常温稳定；避免强氧化剂；对热敏感
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实验操作方法：

1 试剂与材料

•19-羟基蟾毒灵粉末

•DMSO 或无水甲醇

•细胞培养基、PBS缓冲液、胎牛血清（FBS）

•移液器、EP管、细胞培养板等耗材

2 储备液配制

•精密称取适量19-羟基蟾毒灵粉末，用DMSO/甲醇配制成20 mg/mL的母液。

•涡旋振荡或超声助溶至完全澄清。

•配制后分装，-80℃避光保存，避免反复冻融。

3 工作液稀释

•实验前用完全培养基将母液稀释至所需工作浓度。

•推荐浓度梯度：2.5、5、10、20、40 μM。

•确保培养基中DMSO/甲醇的终浓度不超过0.5%。

4 实验操作步骤

•细胞准备：将处于对数生长期的Caco-2（人结肠癌细胞）接种于培养板，待细胞贴壁且融合度达60%-80%时进行加药处理。

•加药处理：设置空白对照组、溶剂对照组（含等量DMSO/甲醇）及不同浓度给药组，每组设3-6复孔。

•孵育：置于37℃、5% CO₂培养箱中孵育24 h。

5 指标检测

•细胞活力检测：采用Transwell实验评估化合物对Caco-2（人结肠癌细胞）活力的影响。

•机制研究：采用Griess试剂法分析相关蛋白表达或基因转录水平变化。

6 数据分析

•实验数据以 Mean ± SD 或 Mean ± SEM 表示。

•使用 GraphPad Prism 软件进行统计分析。

•组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）结合 Tukey 事后检验，P < 0.05 视为具有统计学差异。