BCA蛋白定量试剂盒

产品简介

BCA蛋白定量试剂盒基于 BCA 比色法原理。在碱性环境下蛋白质将二价铜离子还原为一价铜离子，BCA 试剂与一价铜离子结合生成紫色复合物，复合物在 562 nm 处有特征吸收，吸光度值与蛋白浓度呈正比，可检测蛋白样品浓度。适用于裂解液、纯化蛋白、细胞上清等样本的蛋白定量，兼容大部分常见缓冲组分。仅用于体外科研实验，不可用于临床诊断及人体相关检测。

试剂盒组分

- BCA 试剂 A：含 BCA 钠盐、碳酸钠、碳酸氢钠，碱性缓冲体系

- BCA 试剂 B：硫酸铜溶液（Cu²⁺）

- 蛋白标准品：BSA 冻干粉，2 mg/mL 标准储备液（或干粉形式）

技术参数

1. 检测线性范围：20‑2000 μg/mL

2. 检测波长：562 nm（540‑570 nm 均可读数）

3. 检测样本体积：10‑25 μL

4. 工作液颜色：混合后为浅绿色，与蛋白反应变为紫紫色

5. 不受大部分去污剂影响；高浓度 EDTA、DTT、还原剂、螯合剂会干扰检测

储存条件

- 试剂盒整套：2‑8℃避光保存，有效期 12 个月，禁止冷冻

- 蛋白标准品：分装‑20℃保存，避免反复冻融

- BCA 工作液：现配现用，配制后 24 小时内使用

使用方法

1. 配制 BCA 工作液：试剂 A: 试剂 B = 50:1 充分混匀。

2. 稀释蛋白标准品，制作梯度标准曲线。

3. 96 孔板中加入标准品与待测样本，每孔 10‑25 μL。

4. 每孔加入 200 μL BCA 工作液，轻轻混匀。

5. 孵育：37℃孵育 30 min；也可室温放置 60 min。

6. 酶标仪测定 562 nm 吸光值，根据标准曲线计算样品蛋白浓度。

干扰物质说明

可耐受 SDS、Triton X‑100、NP‑40；高浓度 DTT、β‑巯基乙醇、EDTA、EGTA、高浓度还原剂会造成结果偏高，样本需要去除干扰物或者做空白对照校正。

注意事项

1. 试剂 B 含铜盐，避免皮肤眼睛接触，操作佩戴手套。

2. 工作液必须现配现用。

3. 颜色随时间缓慢加深，孵育结束尽快完成读数。

4. 仅供体外科研，不用于临床诊断。

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