SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

产品简介

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒本试剂盒用于配制十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶（SDS‑PAGE），用于蛋白电泳分离，可制备浓缩胶与分离胶，适用于蛋白分子量检测、蛋白纯度鉴定等体外科研实验。仅供科研使用，不可用于临床诊断、人体相关检测。

试剂盒组分

1. 30% 丙烯酰胺‑甲叉双丙烯酰胺储存液（Acr‑Bis）

2. 1.5 M Tris‑HCl（pH 8.8，分离胶缓冲液）

3. 0.5 M Tris‑HCl（pH 6.8，浓缩胶缓冲液）

4. 10% SDS 溶液

5. 10% 过硫酸铵（APS）

6. TEMED（四甲基乙二胺）

注：部分包装 APS 为干粉，需临用前配制。

储存条件

1. 30% Acr‑Bis、1.5M Tris‑HCl、0.5M Tris‑HCl、10% SDS：2‑8℃避光保存。

2. 10% APS：2‑8℃短期保存；长期分装‑20℃避光，现配现用效果最佳。

3. TEMED：2‑8℃密封避光保存，易氧化。

4. 试剂盒整体有效期：12 个月；APS 溶液开封后建议 1 个月内用完。

操作步骤

1. 凝胶配制（以一块胶为例）

根据目标蛋白分子量选择分离胶浓度：

- 8%：适合 80‑140 kDa

- 10%：适合 30‑80 kDa

- 12%：适合 20‑30 kDa

- 15%：适合 10‑20 kDa

分离胶配制（10mL 10% 示例）

30% Acr‑Bis 3.3 mL；1.5M Tris‑HCl (pH8.8) 2.5 mL；10% SDS 0.1 mL；纯水 4.0 mL；10% APS 0.1 mL；TEMED 0.004 mL。混匀后灌入玻璃板，上层加水或者异丙醇封层，室温静置聚合 30‑60 min。

浓缩胶配制（4mL 5% 示例）

30% Acr‑Bis 0.67 mL；0.5M Tris‑HCl (pH6.8) 1.0 mL；10% SDS 0.04 mL；纯水 2.26 mL；10% APS 0.04 mL；TEMED 0.004 mL。倒掉分离胶上层封层液体，灌入浓缩胶，插入梳子，室温静置聚合 20‑40 min。

2. 电泳

拔出梳子，组装电泳槽，加入电泳缓冲液，上样后进行 SDS‑PAGE 电泳。

注意事项

1. 丙烯酰胺单体具有神经毒性，操作佩戴手套，避免皮肤接触；聚合完成后凝胶基本无毒。

2. TEMED、APS 为促凝剂，加入后凝胶会逐步聚合，配胶操作要迅速。

3. APS 氧化失效会导致凝胶无法凝固，建议定期更换。

4. 所有试剂避免直接接触皮肤、眼睛，如不慎接触大量清水冲洗。

5. 仅用于体外科研实验。

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