细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒

产品简介

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒本试剂盒用于从哺乳动物细胞中分步提取细胞浆蛋白与细胞核蛋白，通过低渗裂解释放胞浆蛋白，再利用核裂解液裂解细胞核获得核蛋白。提取得到的蛋白可用于 Western‑blot、EMSA、凝胶迁移、酶活性检测等体外分子实验。仅科研使用，不可用于临床诊断、人体检测。

试剂盒组分

1. 细胞浆蛋白抽提试剂 A（含裂解添加剂，临用前添加）

2. 细胞浆蛋白抽提试剂 B

3. 细胞核蛋白抽提试剂

4. 蛋白酶抑制剂混合物（100×）

技术参数

- 适用样本：贴壁 / 悬浮哺乳动物细胞

- 提取时间：30‑60 min

- 产物：胞浆蛋白、核蛋白分开获得

- 不含叠氮钠；建议全程添加蛋白酶抑制剂防止蛋白降解

储存条件

- 未开封试剂盒：‑20℃避光保存，有效期 12 个月；蛋白酶抑制剂‑20℃保存

- 工作液：裂解添加剂、蛋白酶抑制剂现用现加；配好的裂解工作液 4℃短期存放，不宜长期储存

操作步骤简要

1. 细胞收集：离心收集细胞，预冷 PBS 洗涤 1‑2 次，尽量去除上清。

2. 配制胞浆裂解液：细胞浆蛋白抽提试剂 A 中按比例加入 100× 蛋白酶抑制剂。

3. 重悬细胞，剧烈涡旋，冰浴裂解；加入试剂 B，再次涡旋，冰浴。

4. 高速 4℃离心，上清即为细胞浆蛋白，转移至新管。

5. 沉淀（细胞核）用预冷 PBS 短暂洗涤，弃上清。

6. 加入核蛋白抽提试剂（已加蛋白酶抑制剂），涡旋，冰浴间断震荡裂解细胞核。

7. 4℃高速离心，上清即为细胞核蛋白，分装待用。

使用注意事项

1. 全部操作冰上 / 4℃低温进行，防止蛋白降解。

2. 蛋白酶抑制剂必须临用前加入裂解试剂。

3. 核蛋白溶解度偏低，不要过度稀释；避免反复冻融，提取后分装‑80℃保存。

4. 避免样本反复冻融，提取好的蛋白建议尽快实验。

5. 不适合组织直接抽提，组织样本需要先制备单细胞悬液。

6. 仅供体外科研，不得用于临床诊断。

公司正在出售的产品：