土壤过氧化氢酶(SCAT)测试盒

土壤过氧化氢酶(SCAT)测试盒

产品介绍：

S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类，在H2O2清除系统中具有重要作用。

测定原理：

H2O2在240nm下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT活性的高低。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

检测原理：

酶促分解底物原理：过氧化氢酶催化底物过氧化氢 (H₂O₂) 分解，生成水和氧气；消耗体系中的过氧化氢。

剩余底物检测原理（钼酸铵比色法）：酶反应终止后，测定未被分解的剩余 H₂O₂；剩余过氧化氢越少代表酶活性越高。

显色反应原理：过氧化氢与钼酸铵反应生成黄色过氧‑钼酸络合物；405 nm 测定吸光度。

定量原理：H₂O₂标准曲线得到剩余过氧化氢含量；以灭活土壤作为对照；以单位土重单位时间消耗的 H₂O₂量表示过氧化氢酶活性。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

标准曲线绘制：

取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。

每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

样本检测：

取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。

微量酶标仪法操作步骤

加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。

反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。

终止：每孔加入50μL终止液。

读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。