总糖含量测试盒

总糖含量测试盒

产品介绍：

糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物，包括可溶性的单糖，二糖以及不溶性的淀粉，纤维素，几丁质等。

测定原理：

总糖酸水解为还原糖，在NaOH和丙三醇存在下，DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物，在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色，在540nm处有最大吸收峰，以此测定样品中的总糖含量。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。

检测原理：

核心反应原理：采用苯酚‑硫酸法；强酸（浓硫酸）环境下所有糖类（多糖、寡糖、单糖）水解脱水生成糠醛或羟甲基糠醛衍生物。

靶标反应路径：多糖先被硫酸水解为单糖；单糖脱水生成醛类衍生物，衍生物可与苯酚试剂发生缩合，生成稳定橙黄色复合物。

吸光信号来源：橙黄色产物在490 nm波长处有特征吸收峰，吸光度大小与样本中总糖浓度成正比。

定量计算原理：用葡萄糖标准品梯度制作标准曲线；待测样本吸光值对照标准曲线换算出总糖含量，扣除空白管背景干扰。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

比色法/COD-PAP法/分光光度法操作仪器预热：分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到500~520nm，蒸馏水调零试剂配制：

试剂二：临用前加入10mL蒸馏水充分溶解备用

试剂三：临用前加入20mL蒸馏水充分溶解备用样本测定：

试剂名称(μL) 空白管 测定管

蒸馏水/样本 100 100

试剂一 700 700

试剂二 100 100

试剂三 100 100

混匀后37℃水浴15min，记录500~520nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制：将FC标准品稀释成0、0.031、0.063、0.125、0.25、0.5、1μmol/L系列浓度，同样处理，测定500~520nm处的吸光值，绘制标准曲线

ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：

从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃

设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度