琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒

琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒

产品介绍：

SDH（EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶，位于线粒体内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。

测定原理

SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP)，并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的变化，测定2．6-DPIP的还原速度，代表SDH酶活性。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

检测原理：

人工电子受体比色法（MTT/INT）：SDH 催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸；脱下氢还原四唑盐生成有色甲臜，450‑570 nm 测吸光度计算酶活。

泛醌类似物偶联显色法：以可溶性泛醌类似物为电子受体，还原产物与显色剂结合产生颜色变化。

DCIP（2,6‑二氯靛酚）褪色法：还原当量将蓝色 DCIP 还原为无色，600 nm 吸光度下降速率即为 SDH 活性。

氧气消耗速率法（氧电极配套试剂盒）：SDH 脱氢经呼吸链消耗溶解氧，氧浓度下降速率表征酶催化活力。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：

取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）

用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值

以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：

试剂名称(μL) 空白管 测定管

提取液/样本 100 100

试剂一 700 700

试剂二 100 100

混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定