胼胝质含量测试盒

胼胝质含量测试盒

产品介绍：

胼胝质（callose）是围绕每个筛孔的边缘积累的碳水化合物，是一种以β-1,3键结合的葡聚糖，在植物的筛管代谢、配子体发育等生命活动中发挥着重要的调节作用，其合成、分解直接关系植物正常的生长代谢过程。

测定原理：

胼胝质与苯胺蓝染料反应，产生荧光物质，在激发波长400nm，发射波长500nm下荧光强度。

自备仪器和用品：

研钵、冰、低温离心机、荧光酶标仪、黑色96孔板、可调式移液器、乙醇和蒸馏水。

检测原理：

胼胝质提取：植物样本经强碱加热裂解，细胞壁中 β‑1,3‑葡聚糖（胼胝质）溶出，离心去除固体残渣得到待测上清液。

苯胺蓝特异性染色结合：酸性环境下苯胺蓝染料与胼胝质多糖链特异性结合，形成荧光络合物。

荧光强度检测：使用荧光分光光度计，选定激发波长与发射波长读取荧光信号强度。

标准曲线定量：以葡聚糖类似物作为标准品绘制曲线，计算样本胼胝质含量。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

标准曲线绘制：

取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。

每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

样本检测：

取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。

微量酶标仪法操作步骤

加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。

反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。

终止：每孔加入50μL终止液。

读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。