牛鼻炎病毒通用PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒为牛鼻炎病毒通用型检测产品，基于保守基因序列设计通用引物探针，可覆盖牛鼻炎病毒各主流亚型的核酸检测，适配牛鼻腔拭子、鼻部分泌物、呼吸道黏膜组织样本。试剂盒通用性强、覆盖面广，同时具备高特异性与灵敏度，可一次性筛查各类牛鼻炎病毒感染情况。适用于牛鼻炎疫病批量筛查、亚型初步鉴别、养殖环境疫病监测及畜禽呼吸道病毒综合防控工作。

基础原理：

设计通用保守引物靶向所有牛鼻炎病毒 3D 聚合酶基因，qRT-PCR 荧光信号广谱检出全部亚型牛鼻炎病毒。

通用 RT-PCR 扩增病毒 VP4 基因，电泳条带阳性证明样本存在任意型别牛鼻炎病毒。

熔解曲线分型 RT-PCR，扩增通用靶标后通过不同 Tm 值区分牛鼻炎病毒各亚型。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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