D-Luciferin, potassium salt D-荧光素钾盐 新品

D-Luciferin, potassium salt D-荧光素钾盐

英文名称：D-Luciferin, potassium salt
CAS：115144-35-9
分子式：C11H7N2KO3S2
分子量：318.41
外观：黄色粉末。
纯度：≥ 99% (HPLC)
Ex (nm) ：328
Em (nm)：533
溶剂：Water
保存条件：-20℃干燥避光保存，有效期二年。
  D-虫荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物，其量子效率为0.88，是Luminol的20倍。反应原理：首先，在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应，接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用，用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。

D-Luciferin, potassium salt D-荧光素钾盐

1、D-荧光素适合做哪些实验?

D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素，作为Luciferase的作用底物，常用于以下实验：

    1. 报告基因分析

    2. In vivo imaging (动物活体成像)

    3. In vitro imaging (细胞体外分析)

    4. ATP测定

    5. 其它luciferase及其基因相关的分析和研究工作

2、D-荧光素应用于活体成像的基本原理

细胞中D-荧光素酶参与的化学发光反应遵守酶促反应的基本原理，在底物D-荧光素钾过量的情况下，反应产生的光子数（发光量）与细胞中的D-荧光素酶的量成正相关，从而可以推算出细胞的数量。

3、D-荧光素钾盐溶液的稳定性

D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液，溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。

溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5（发生水解作用）或>7.5（发生消旋化作用，D型转化为L型）的情况下，D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气，将加速D-荧光素钾的降解速度。

D-荧光素配成溶液后，在的保存条件（-80°C，pH，无氧气）下，存在固定的降解速度：0.2%/天，因此配成溶液保存的D-荧光素应尽量在1年内使用完。

有水存在的情况下，主要发生消旋化作用，即D-荧光素转化成L-荧光素，有报道称L-荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作用。

4、D-荧光素、D-荧光素钠和D-荧光素钾之间的区别

主要区别在于溶解和分散性能。D-荧光素钾盐在水和缓冲液中的溶解度高，且溶解速度较快，故在一般的生物学试验中常用D-荧光素钾盐。

5、D-荧光素钾盐的保存和运输条件 

保存条件：≤-20°C，避光，保持干燥。（在不打开包装的条件下，可保存两年时间）。

运输条件：高纯度的D-荧光素钾盐可在短时间内常温条件下保存，运输条件为常温。

原装（没有打开包装）荧光素的包装瓶中充有氩气，保证其稳定性，打开包装后，请严格按照保存条件保存。

D-荧光素钾盐具有易溶于水的特性，其暴露于空气中，易吸潮。在称量过程中，请考虑其易吸潮的特性，先进行温度平衡，再快速称取

1. 注意事项
a) D-荧光素有三种形式，分别为游离态, 钾盐、和钠盐 ，钠盐和钾盐形式的 D-荧光素易溶于水性缓冲液 (pH 6.1-6.5)，储备液可用无ATP的水配制，-20℃避光保存。游离态须用 DMSO 或者适当的碱中和才能溶解。在较高的 pH 值下，荧光素会在碱催化下形成脱氢荧光素，并外消旋化为 L-异构体。
b) D-荧光素可用于任何现有的报告分析或 ATP 分析系统。
c) 如果测试 ATP，请戴上手套并使用不含 ATP 的容器，以尽量减少所有可能的 ATP 污染源。仅使用无菌的无 ATP 水和试剂。使用高压灭菌水制备所有试剂。
2. 实验方案
本方案仅提供一个指导，应根据您的具体需要进行修改。
2.1 体外生物发光图像分析的示例方案
a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。拌匀。立即使用，或一次性分装，-20℃ 保存，避免反复冻融，避免光照。
b) 制备0.5-1 mM D-Luciferin工作液，预热组织培养基。
c) 从培养的细胞中吸出培养基。
d) 向细胞中加入荧光素工作液，并在成像前于 37℃ 孵育细胞 5-10 分钟。
2.2 体内实验
由于体内实验剂量较大，一般为 150 mg/kg，建议选择钾盐或者钠盐产品。
2.3 荧光素报告基因检测的示例方案
a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。立即使用，或一次性分装，-20℃ 保存，避免反复冻融，避免光照。
b) 配制 1 mM D-Luciferin 工作液和 3 mM ATP，1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 溶于 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8。
c) 将 5-10 μL 细胞裂解物移至微孔板中。使用裂解试剂或不含裂解物的缓冲液作为空白。
d) 根据制造商的说明用荧光素工作溶液灌注发光计。
e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液，积分时间为 10 秒.

上海语纯生物科技有限公司，是由具有生命科学、生物技术背景人员共同创办的技术企业。公司主营业务:细胞系，原代细胞，原代内皮、上皮、成纤维、软骨细胞等专用培养基（可替代进口品牌例如sciencell货号：1001），细胞基础培养基及定制氨基酸缺陷培养基（例如：DMEM高糖、RPIM1640、MEM、DMEM/F12等），微生物培养基及菌种，进口胎牛血清、国产胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、马血清、无外泌体胎牛血清、透析胎牛血清等，可根据需求定制。生化试剂盒，elisa试剂盒，动物血液制品：动物血浆、动物红细胞、动物全血、动物白细胞等，感受态，各种生化试剂以及耗材。为高校、食品、医药、生物研究等领域提供相关技术支持和服务。 

【特别声明】

1. 本产品仅用于科研实验，不可用于临床治疗。

2. 使用产品时应注意无菌操作，避免污染。

3. 操作时请做好防护工作，避免试剂与皮肤黏膜接触，如有请立即用自来水冲洗。

4. 本产品请在有效期内使用，如有破损渗漏，请勿使用。