人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒

本试剂盒采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法原理，预先将特异性ATM抗体包被于酶标板微孔中，加入待测样本、标准品后，样本中的ATM抗原会与包被抗体特异性结合，再加入酶标记二抗形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过充分洗涤去除未结合杂质，加入底物液进行显色反应，最后通过终止液终止反应，利用酶标仪测定各孔吸光度值，结合标准曲线即可精准计算样本中ATM的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出量＜1.2 pg/mL

检测范围：2.5pg/mL～80pg/mL

反应时间：样本孵育 60min，酶结合物孵育 30min，显色 15min，总耗时 105min

保存条件：试剂盒整体 2～8℃避光密封保存，标准品分装后 - 20℃冻存避免反复冻融

显色系统：TMB 单组份显色液，终止液为 2M 硫酸溶液

检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm

标准曲线绘制：设置 7 个梯度标准品浓度，以标准品浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，采用四参数 Logistic 拟合生成标准曲线

注意事项：全程避免核酸酶污染，加样枪头一次性使用，孵育阶段严禁孔板风干
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

样本稀释：按试剂盒说明书配比稀释待测血清 / 组织匀浆样本，充分涡旋混匀，室温静置 5min 备用；同时配制梯度浓度 ATM 标准品系列溶液。

板孔加样：包被板每孔依次加入标准品、待测样本、空白对照液各 100μL，全程避免孔内产生气泡，记录加样排布表。

酶结合物添加：所有孔直接加入 HRP 标记一抗工作液 100μL，封板膜密封酶标板，轻轻震荡混匀 30s。

恒温孵育：将封好的酶标板置于 37℃恒温孵育箱，避光孵育 60min，期间不可随意挪动酶标板。

洗板操作：撕去封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤缓冲液，浸泡 30s 后拍干，重复洗板 5 次，孔内无残留水渍。

显色反应：每孔加入显色底物 A 液、B 液各 50μL，避光室温显色 15min，肉眼观察标准品孔出现清晰蓝色梯度。

终止读数：每孔快速加入终止液 50μL 终止酶促反应，酶标仪设置 450nm 波长测定各孔 OD 值，根据标准曲线计算样本 ATM 浓度。