人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒

本试剂盒运用经典双夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定抗人CK-18特异性抗体，待测样本中的细胞角蛋白18可与固相抗体高效特异性结合，洗涤去除非特异性杂质后，加入酶标记二抗形成三元免疫复合物，再次洗板后启动底物显色，显色深浅与CK-18含量正相关，实现样本靶蛋白的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒

英文名称：CK-18   Elisa Kit
货号：Y-E278

规格：48T/96T

灵敏度：检出限 0.04ng/mL

检测范围：0.07～7.9ng/mL

反应时间：样本孵育 87min，二抗 55min，显色 20min

保存条件：试剂盒 2～8℃冷藏，终止液常温密封存放

显色系统：双组份 TMB 显色，硫酸终止反应

检测波长：450nm+600nm 双波长读数

标准曲线绘制：空白孔校正基线后四参数拟合

注意事项：凋亡细胞上清中 CK18 片段富集，样本不可反复冻融裂解细胞
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 32min，CK18 捕获抗体包被板弃保存液，洗涤液洗板 1 次后拍干微孔。

区分空白孔、系列标准品孔、血清待测样本孔；标准品孔加入梯度 CK18 标准品 60μL，样本孔加入预处理稀释血清 60μL，空白孔添加稀释缓冲液。

每孔加入酶结合抗体 60μL，封板封闭，37℃湿盒孵育 74min。

掀开封板倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 35s 弃液，连续洗板 6 次，用力拍干微孔。

每孔加入显色混合底物 100μL，避光 37℃显色 15min。

每孔加注终止液 50μL，轻摇板体终止底物显色。

450nm 读取 OD 数值，对照曲线计算 CK18 浓度。
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