人细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定抗人CTX特异性抗体，待测样本中的细胞毒素与固相抗体特异性免疫结合，孵育洗板后加入HRP标记二抗形成稳定三元免疫复合物，再次洗板纯化体系后加入底物显色，显色深浅与CTX含量正相关，通过标准曲线拟合精准定量样本中细胞毒素浓度。
基本参数‌：

产品名称：人细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒

英文名称：CTX ELISA Kit
货号：Y-E2674

规格：48T/96T

灵敏度：检出限 0.09pg/mL

检测范围：0.17～15pg/mL

反应时间：室温振荡孵育 77min，二抗 46min，显色 18min

保存条件：试剂盒 2～8℃，稀释标准品不可留存过夜

显色系统：双组份混合显色底物

检测波长：450nm 为主，600nm 参比波长

标准曲线绘制：7 个梯度浓度，剔除异常孔后非线性拟合

注意事项：毒素样本具备生物危害性，操作全程佩戴一次性防护手套
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 28min，CTX 抗体包被酶标板去除保存液，洗涤液洗板 2 遍，拍干微孔残留液体。

排布孔位：空白对照孔、倍比标准品孔、细菌培养上清样本孔；标准品孔加入 CTX 标准品 55μL，样本孔加入稀释上清液 55μL，空白孔添加稀释缓冲液。

每孔加入 HRP 标记二抗 55μL，覆膜封板，37℃孵育 61min。

弃废液，洗板液注满每孔静置 35s 倒掉，洗板 4 次，充分拍干微孔。

加入显色 A、B 液各 50μL，遮光 37℃显色 15min。

滴加终止液 50μL，轻微震荡终止显色。

450nm 波长读数，定量检测细胞毒素 CTX 浓度。
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