人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接酶联免疫吸附原理，酶标板微孔预先包被纯化的戊型肝炎病毒抗原，待测样本中的HEV-IgG抗体可与固相病毒抗原特异性结合，洗板去除未结合杂质后，加入酶标记抗人IgG二抗进行特异性结合，再次洗板后加入底物显色，显色深浅与样本中HEV-IgG抗体含量正相关，通过标准曲线比对定量检测抗体水平。
基本参数‌：

产品名称：人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒

英文名称：HEV-IgG  Elisa Kit
货号：Y-E622

规格：48T/96T

灵敏度：最低阳性检出滴度 1:10

检测范围：0.3～50AU/mL

反应时间：样本孵育 63min，二抗 37min，避光显色 13min

保存条件：试剂盒 2～8℃，不可冷冻防止抗体失活

显色系统：HRP-TMB 经典显色体系

检测波长：450nm+630nm 双波长

标准曲线绘制：阴阳对照孔判定阈值，半定量拟合参考曲线

注意事项：窗口期样本易出现假阴性，需间隔复测确认结果
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 30min，HEV 抗原包被板去除保存液，洗涤缓冲液洗板 2 遍，拍干微孔。

规划孔位：空白孔、阳性梯度标准孔、血清样本孔；标准品孔加入 HEV-IgG 阳性标准品 55μL，样本孔加入稀释血清 55μL，空白孔添加稀释缓冲液。

每孔加入 HRP 标记抗人 IgG 二抗 55μL，封板膜密封，37℃孵育 65min。

弃去孔内废液，洗涤液浸泡每孔 40s 弃除，洗板 4 次，充分拍干微孔残留洗液。

加入显色 A、B 液各 50μL，遮光 37℃显色 16min。

滴加终止液 50μL，轻微晃动终止酶反应。

450nm 读取 OD 值，判定 HEV-IgG 抗体阴阳性与滴度。
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