人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相酶标板包被人PG-A特异性抗体，样本中的胃蛋白酶原A与固相抗体特异性结合，孵育完成抗原抗体反应后洗板去除游离组分，加入辣根过氧化物酶标记二抗形成免疫复合物，洗除未结合抗体后加入底物显色，显色强度与PG-A含量成正比，通过标准曲线比对精准定量样本中胃蛋白酶原A浓度。
基本参数‌：

产品名称：人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒

英文名称：PG-A Elisa Kit
货号：Y-E3111

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.2ng/mL

检测范围：0.5～160ng/mL

反应时间：37℃孵育 64min，酶标二抗 40min，显色 21min

保存条件：所有组分 2～8℃避光，终止液常温密封存放

显色系统：单组分即用 TMB 显色液

检测波长：450nm 单波长测定吸光值

标准曲线绘制：四参数拟合曲线，高浓度样本建议梯度稀释复测

注意事项：胃液样本需中和 pH 值后再上样，强酸会破坏包被抗体
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 28min，PG-A 包被微孔板去除保存液，洗涤缓冲液洗板 2 遍，倒扣拍干微孔水分。

区分空白、标准、血清样本孔；标准品孔加入梯度 PG-A 标准品 55μL，样本孔加入稀释血清样本 55μL，空白孔添加稀释液。

每孔加入 HRP 标记抗体 55μL，覆膜封板，37℃孵育 63min。

倒掉孔内反应废液，洗涤液浸泡每孔 30s 弃液，洗板 4 次，充分拍干微孔。

加入显色 A、B 液各 50μL，遮光 37℃显色 19min。

加入终止液 50μL，轻微晃动酶标板终止酶反应。

450nm 读取 OD 值，标准曲线计算 PG-A 含量。
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