人轮状病毒(RV)IgM ELISA试剂盒

本试剂盒采用捕获法ELISA检测原理，微孔板包被抗人IgM μ链抗体，可捕获样本中的人轮状病毒IgM抗体，再加入轮状病毒特异性抗原和酶标抗体形成免疫复合物，经显色反应后，显色深浅与RV IgM抗体含量正相关，实现样本中RV IgM的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：急性期 IgM 阳性检出率≥98%

检测范围：抗体半定量区间 0–85AU/mL

反应时间：整套实验耗时 106min

保存条件：试剂盒 2~8℃，废弃标本按感染性医疗废物处理

显色系统：临床专用 TMB 显色液

检测波长：450nm

标准曲线绘制：阴阳对照孔判定结果，定量采用参考品拟合曲线

注意事项：婴幼儿粪便上清样本充分离心去除颗粒物再上板
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

样本前处理：粪便稀释上清离心取澄清液体，去除大颗粒杂质；

加样布设：每孔加入对照品、待测粪便上清 100μL；

一步酶标孵育：直接加入酶标记抗原液，覆膜 37℃孵育 73min；

洗板除杂：洗涤液浸泡 34s，拍干，循环洗板 6 次；

避光显色：加入显色液 20min；

终止操作：加入终止液终止显色反应；

阴阳性判读：酶标仪对照临界值判定轮状病毒 IgM 抗体结果。