人维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒

本试剂盒采用特异性抗原抗体夹心ELISA原理，固相酶标板包被抗人VDR特异性抗体，待测样本中的维生素D受体与固相抗体特异性结合，洗板去除游离杂质后，加入酶标记二抗形成完整免疫夹心复合物，经充分反应和洗涤后，加入显色底物发生酶促显色反应，显色强度与样本VDR含量成正比，通过标准曲线分析实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒

英文名称：VD R ELISA Kit
货号：Y-E2709

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 0.05ng/mL

检测范围：0.1～7.5ng/mL

反应时间：封闭 25min，样本孵育 88min，二抗 56min，显色 16min

保存条件：包被板单独密封 2～8℃，其余试剂统一冷藏避光

显色系统：即用型单组分 TMB 显色液

检测波长：450nm+630nm 双波长校正

标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合，强制空白孔归零

注意事项：操作全程避免强光直射，受体蛋白易发生构象改变
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 30min，VDR 抗体包被板去除孔内保存液，洗涤缓冲液洗板 2 次，拍干微孔。

设立空白孔、梯度标准孔、细胞蛋白样本孔；标准品孔加入 VDR 标准品 55μL，样本孔加入稀释蛋白裂解液 55μL，空白孔加稀释缓冲液。

每孔加入 HRP 检测抗体 55μL，覆膜封板，37℃孵育 65min。

弃去孔内反应液，洗涤液浸泡每孔 40s 弃液，洗板 5 次，倒置充分拍干微孔。

分别加入显色 A、B 液各 50μL，遮光室温显色 13min。

加入终止液 50μL，轻微震荡终止酶促反应。

450nm 波长检测吸光度，对照标准曲线计算 VDR 表达量。
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