人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板包被PIPLC特异性抗体，样本中的人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C与固相抗体特异性结合，加入酶标记检测抗体构建免疫夹心结构，经显色、读数、曲线换算，可定量检测样本中PIPLC的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：LOD≤0.07ng/mL

检测范围：0.25ng/mL–14ng/mL

反应时间：整套流程耗时 158min

保存条件：试剂盒 2–8℃避光，终止液远离碱性试剂存放

显色系统：TMB 双组分显色体系

检测波长：450/630nm

标准曲线绘制：6 点梯度标准品非线性拟合曲线

注意事项：洗板每孔至少加注洗涤液 3 次，每次浸泡 30 秒
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

样本稀释：待测生物样本上清稀释，涡旋震荡去除气泡；

微孔加样：预包被板分孔加标准品与待测样本，单孔 100μL；

一步免疫孵育：直接加入酶标记试剂，封板 37℃孵育 55min；

洗板除杂：洗涤液浸泡 28s，拍干，洗板 5 次；

显色孵育：加入显色液避光 12min；

终止混匀：加入终止液终止显色；

定量分析：酶标仪 450nm 读数，换算 PIPLC 含量。