人糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用酶联免疫吸附检测原理，通过固相包被的人GSP特异性抗体，特异性捕获待测样本中的糖化蛋白，孵育完成抗原抗体结合反应后，洗涤清除体系中未结合的杂质蛋白，加入酶标记二抗构建夹心免疫复合物，再次洗板后加入显色底物进行显色反应，终止显色后检测各孔吸光度，根据标准品梯度浓度对应的吸光度绘制标准曲线，进而精准计算样本中糖化蛋白的含量。
基本参数‌：

产品名称：人糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒

英文名称：GSP ELISA Kit
货号：Y-E2904

规格：48T/96T

灵敏度：检出限≤0.11mmol/L

检测范围：0.2～18mmol/L

反应时间：37℃孵育样本 65min，二抗 35min，底物显色 22min

保存条件：试剂盒 2～8℃保存，终止液常温密封储存即可

显色系统：HRP 催化 TMB 显色，硫酸终止显色反应

检测波长：450nm 单波长检测

标准曲线绘制：6 个标准浓度点，线性回归绘制标准曲线

注意事项：血清样本采集后 4h 内分离上清，糖化产物易降解影响结果
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 28min，取出 GSP 包被酶标板，去除孔内保护液，洗涤缓冲液清洗微孔 2 次，拍干备用。

设置空白孔、标准品梯度孔、血清待测样本孔；标准品孔加入倍比稀释 GSP 标准品 50μL，样本孔加入稀释血清样本 50μL，空白孔加稀释液。

每孔加入酶结合抗体液 50μL，覆膜封板，37℃孵育 58min。

弃废液，每孔加满洗涤液浸泡 35s 后丢弃，洗板 6 次，吸水纸拍干微孔。

每孔加入显色底物液 100μL，室温避光显色 17min。

加入终止液 50μL 终止酶促反应，轻摇混匀。

450nm 读取吸光值，根据标准曲线计算糖化蛋白含量。
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