人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒

本试剂盒运用酶联免疫吸附夹心检测法原理，酶标板预先包被人PC特异性抗体，待测样本中的羰基化蛋白可与包被抗体特异性结合，洗涤除去未结合的杂蛋白及杂质后，加入酶标记抗PC二抗并形成稳定的免疫夹心复合物，经二次洗板去除游离标记抗体，加入显色底物发生酶促显色反应，显色深浅与样本中PC含量成正比，通过酶标仪检测吸光度，对照标准曲线即可测定样本中羰基化蛋白的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒

英文名称：PC ELISA Kit
货号：Y-E2941

规格：48T/96T

灵敏度：最小可测值 0.1nmol/mg 蛋白

检测范围：0.2～15nmol/mg 总蛋白

反应时间：封闭 30min，样本孵育 75min，显色反应 20min

保存条件：试剂盒主体 2～8℃；底物液需单独避光 2～8℃保存

显色系统：改良型 TMB 显色底物，终止后溶液由蓝转黄色

检测波长：单波长 450nm 直接读数，无需参比孔

标准曲线绘制：五组梯度标准品，Origin 软件四参数拟合，R² 要求＞0.995

注意事项：组织样本需充分裂解并定量总蛋白，否则结果偏差显著
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 20min，取出 PC 抗体包被板，倒掉孔内保存液，洗涤液洗孔 2 遍，吸水纸拍干微孔板。

排布孔位：空白孔、标准品梯度孔、待测样本孔；标准品孔加入不同浓度 PC 标准品 50μL，样本孔加入蛋白提取后待测液 50μL，空白孔加稀释缓冲液。

每孔加入辣根过氧化物酶标记抗体液 50μL，封板密封，37℃水浴孵育 55min。

弃去孔内反应液，每孔加满洗涤液浸泡 35s 弃除，重复洗板 4 次，倒置拍干残留洗液。

每孔分别加入显色 A 液 50μL、显色 B 液 50μL，避光环境 37℃孵育显色 18min。

每孔滴加终止液 50μL，混匀终止底物显色。

酶标仪 450nm 测吸光度，依据标准曲线计算样本羰基化蛋白浓度。
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