人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将特异性PPIL1抗体包被于酶标板微孔内壁，实验时样本、标准品中的人PPIL1抗原会与包被抗体特异性结合，洗板去除未结合杂质后，加入酶标记二抗形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，再次洗板去除游离酶标抗体，加入底物进行显色反应，底物在酶的催化下产生有色产物，最终通过酶标仪测定吸光度值，吸光度值与样本中PPIL1含量呈正相关，结合标准品曲线即可精准计算样本中PPIL1的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒

英文名称：PPIL1  Elisa Kit
货号：Y-E922

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出浓度≤0.08ng/mL

检测范围：0.15ng/mL～10ng/mL

反应时间：样本孵育 60min，二抗孵育 45min，底物显色 15min

保存条件：未拆封试剂盒 2～8℃避光储存；开封后板条密封 2～8℃可存 7 天

显色系统：TMB 单组分显色液，终止液为 2M 稀硫酸

检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm

标准曲线绘制：以标准品浓度为 X 轴，OD 均值为 Y 轴，四参数 Logistic 拟合曲线

注意事项：样本需离心去除沉淀杂质，避免反复冻融样本超过 2 次
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 30min，取出包被 PPIL1 抗体微孔板，弃板内原有保护液，洗涤缓冲液洗板 2 次，拍干孔内残留液体。

设置空白孔、标准品孔、待测样本孔，标准品孔依次加入梯度稀释 PPIL1 标准品 50μL，样本孔加入稀释后待测样本 50μL，空白孔加等量样本稀释液。

每孔立即加入 HRP 标记检测抗体工作液 50μL，封板膜密封微孔板，37℃恒温孵育 60min。

揭去封板膜，倒掉孔内全部液体，每孔加满洗涤液静置 30s 后甩去，重复洗板 5 次，倒扣吸水纸上充分拍干。

所有孔依次加入显色底物 A 液、B 液各 50μL，轻柔震荡混匀，37℃避光显色 15min。

每孔快速加入终止液 50μL 终止酶促显色反应，轻晃微孔板混匀。

酶标仪设置 450nm 波长，15min 内读取各孔 OD 吸光度值，根据标准品曲线计算样本 PPIL1 浓度。
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