人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，微孔板固相固定人胎盘催乳素(HPL)特异性抗体，样本与标准品中的HPL抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记配对抗体，构建稳定免疫复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，数值与样本中HPL浓度呈正相关，依托标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒

英文名称：HPL ELISA Kit
货号：Y-E2718

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 0.04μg/mL

检测范围：0.2μg/mL ~ 32μg/mL

反应时间：室温孵育 82min，酶二抗 57min，避光显色 20min，总用时 2h39min

保存条件：试剂盒 2~8℃避光存放，拆分板条密封防潮，洗涤液可常温放置

显色系统：双组份配比显色体系，2mol/L H₂SO₄终止反应

检测波长：仅 450nm 波长读取吸光度

标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合标准曲线，7 个浓度梯度

注意事项：非孕期样本含量极低，超出下限按阴性判定；胎盘组织匀浆样本充分离心去杂质
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂室温静置 32min，配制洗涤工作液，倍比稀释 HPL 标准品，取出实验所需酶标板条。

标准孔添加 50μL 梯度标准品；样本孔加 45μL 稀释液 + 15μL 待测血清；空白孔空置不加液。

非空白孔加入酶偶联抗 HPL 抗体 100μL，封板密封，37℃孵育 63min。

撕膜弃液，洗涤液加满每孔静置 36s，甩干洗板 5 次，充分拍干微孔板。

显色 A、B 液各 50μL 加入每孔，震荡混匀，避光显色 16min。

滴加 50μL 终止液混匀终止显色。

酶标仪 450nm 测 OD 值，换算样本胎盘催乳素 HPL 浓度。
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