人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，微孔板固定人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)特异性抗体，加入待测样本与系列标准品，样本中的ASM抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记配对抗体，形成夹心免疫复合物，底物显色终止后检测吸光度，吸光度值与样本中ASM蛋白含量呈线性正相关，可精准定量靶标浓度。
基本参数‌：

产品名称：人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA试剂盒

英文名称：ASM Elisa Kit
货号：Y-E3026

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 4.1pg/mL

检测范围：24pg/mL ~ 1180pg/mL

反应时间：37℃孵育 85min，二抗结合 53min，避光显色 21min，总用时 2h39min

保存条件：2~8℃存放整套试剂盒，干粉标准品 - 20℃长期保存，复溶后仅限单次实验

显色系统：双组份 TMB 显色体系，2mol/L 硫酸终止变色

检测波长：450nm 主波长，650nm 参比波长

标准曲线绘制：五参数非线性回归拟合，6 个标准稀释梯度

注意事项：尼曼匹克病样本 ASM 含量显著异常；匀浆样本需去除细胞碎片沉淀
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

全部试剂室温平衡 35min，稀释洗涤缓冲液，逐级稀释 ASM 标准品，准备实验用酶标板。

标准孔加 50μL 梯度标准溶液；待测孔加 43μL 稀释液 + 7μL 待测生物样本；空白孔不加液体。

除空白孔外每孔加入 HRP 标记抗 ASM 抗体 100μL，封板 37℃孵育 71min。

弃净孔内液体，洗涤液浸泡 40s 甩干，循环洗板 6 次，充分拍干板条残留液体。

每孔加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色 20min。

每孔加注终止液 50μL 混匀终止酶促反应。

酶标仪 450nm 读数，拟合标准曲线定量 ASM 蛋白浓度。
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